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液相色谱流动相如何调流动相比例

  • Insm_3f1c6429
    2021/11/06
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 请教各位老师,例如要求主峰保留时间在18min 左右,图片中的两种方式,第一种是A相比例都增加(或减少)整体调,第二种只是前几分钟A相比例增加或减少,后面时间的比例不变。请问哪种是对的呢。
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  • mingxiaoyan

    第1楼2021/11/08

    流动相调整有三个规则:
    一、由强到弱:

    一般先用90%的乙腈或甲醇-水或缓冲溶液进行试验,可很快得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。

    二、三倍规则:

    每减少10%的有机溶剂(乙腈或甲醇)的量,保留因子增加约3倍,此为三倍规则。调整时注意观察各个峰的分离情况。

    三、粗调转微调:

    当分离达到一定程度时,应将有机溶剂(乙腈或甲醇)10%的改变量调整为5%,并据此规则逐渐降低调整率,直至各组分的分离情况不再改变。

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  • dadgoh

    第2楼2021/11/09

    应助达人

    看一下两个梯度的谱图

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  • Insm_3f1c6429

    第3楼2021/11/09

    谢谢
    但是还是想知道图片上的两种调整比例的方法哪个是准确的呢(整体调和单独主成分出峰时间段调)

    mingxiaoyan(mingxiaoyan) 发表:流动相调整有三个规则:一、由强到弱:一般先用90%的乙腈或甲醇-水或缓冲溶液进行试验,可很快得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。二、三倍规则:每减少10%的有机溶剂(乙腈或甲醇)的量,保留因子增加约3倍,此为三倍规则。调整时注意观察各个峰的分离情况。三、粗调转微调:当分离达到一定程度时,应将有机溶剂(乙腈或甲醇)10%的改变量调整为5%,并据此规则逐渐降低调整率,直至各组分的分离情况不再改变。

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  • 有水有渝

    第4楼2021/11/11

    应助达人

    要求主峰保留时间在18min 左右,这个是比原始的要提前还是要推后,色谱柱用的是反相色谱吗,A、B相分别是什么,如果是反相,提前就是相同时间处提高有机相的比例,反之降低比例

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