GPC——样品在辐射降解下谱图曲线几乎无变化?不知如何分析
本人新手刚刚GPC上手,目前正在进行多糖的辐射降解后分子量的测定的工作,GPC的参数是:柱温40,流速0.50,流动相0.2mol/LNaCl溶液,样品和标准品浓度2mg/ml,进样体积60μL,色谱柱SB-806HQ(排阻极限2*10^ 7)。
上面的图为标准品的色谱图,下面那张图是我样品的图。样品色谱图并没像文献内的峰型,保留时间也不一样,感觉除了未辐射降解的色谱图曲线有所区别之外,其余的都差不多,也不知从哪儿切峰,随之计算出的Mw也不对。
麻烦各位老师帮忙看下,我的问题出在哪儿,在下感激不尽!
王大虎
第4楼2022/04/23
谢谢您的解答,我现有几点疑惑,劳烦再问您一下。
首先流动相是0.2mol/L的NaCl溶液,而样品和标准品也是流动相 0.2mol/L的NaCl溶液配制的,但是测出来的溶剂峰,一个是正峰,一个是倒峰,是不是因为我的流动相的盐浓度过高了。
其次我的样品的相对分子质量是80W左右,降解后应该在14min之后也会出现几个峰,可是它只有在17min,19min,20min出现三个峰,然后17min和19min还出现了一种趋势:随着辐照剂量的增大,它们的保留时间有往前走的趋势,我没理解错的话就是分子量逐渐变大了,不是很符合辐射降解后分子量越来越小的趋势。
小不董
第5楼2022/04/24
那你可以用盐浓度低一点的水溶液来溶解,看是否出现倒峰,或者就用这0.2mol/L的NaCl溶液进一针来确认是否是溶剂峰,这个正峰和倒峰的时间是否一致。
至于你样品被辐射降解后,生产物,要你理解,辐射剂和降解产物的关系。按照GPC分离原理,保留时间越靠前,是分子量越大。其实还有个因素,你样品的浓度问题,是否一致,降解前后样品的信号相应是否一致,检测信号是否和浓度成正比。