中药材罗布麻叶测定注意事项
罗布麻叶经过提取杂质较多色素类物质较多，在测定罗布麻叶时候流动相应该在实验中注意的问题做一下讨论：
1 材料
罗布麻叶药材（送检样）；乙腈（色谱级），甲醇、磷酸（分析纯）；金丝桃苷对照品（购自中检院）。
2 仪器与设备
岛津液相LC-20AT配制UV/DAD检测器，安家Eclipse XDB C18色谱柱(250mm*4.6μm*5μm)，超声波清洗器。
3 实验方法
3.1 色谱条件
流动相（参照中国药典2020年第一部）：乙腈-0.2%磷酸水为流动相进行洗脱；检测波长256nm；柱温：35℃；流速：1.0 mL/min，进样量：10μL。
3.2对照品溶液制备
取金丝桃苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含36μg的溶液，即得。
图1 金丝桃苷标准品色谱图
3.3 供试品溶液的制备
取本品粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
图2 罗布麻叶样品色谱图
讨论：（1）罗布麻叶中含有色素类物质较多，提取溶液颜色较重，在实验处理过程中要注意滤膜选择0.22μm滤膜过滤干净之后上机检测，防止堵塞色谱管道，做叶子类物质也建议使用色谱柱保护预柱，防止污染色谱柱；
(2)我们从样品的色谱图可以看出在金丝桃苷目标峰出现之后后面还有很多杂质出现，所以我们在目标峰出现后，设置一个梯度洗脱，以免影响下一个样品出峰，同时也能保护柱子的使用寿命。
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