西达本胺抑制SCLC细胞增殖和凋亡
CCK-8药敏实验结果表明,SCLC细胞系H69、H446、H526、DMS114经不同浓度西达本胺处理 24、48、72、96、120 h后,细胞产生明显的增殖抑制现象,且随着药物浓度增加及作用时间延长,抑制作用逐渐增强,呈现出时间-浓度依赖性,如图2所示。同时得到西达本胺对四种细胞系作用72h后的IC10、IC20、IC50见表1-8。结果显示四种细胞系对西达本胺均较为敏感,其中,与H69相比,DMS114对西达本胺相对不敏感。
不同浓度西达本胺作用不同时间后对H69的增殖抑制情况
表1-8 西达本胺作用72 h后达到不同抑制效果的药物浓度(μmol/L)
细胞名称
| IC10 | IC20 | IC50 |
H69 | 0.423 | 0.632 | 2.916 |
H446 | 0.404 | 0.571 | 1.033 |
H526 | 0.118 | 0.261 | 1.015 |
DMS114 | 1.272 | 2.815 | 10.943 |
西达本胺改变SCLC细胞形态
不同浓度(0、IC20、IC50)西达本胺作用于H69、H446、H526、DMS114细胞48及72 h后在显微镜下观察细胞形态改变如图1-3所示。随着药物浓度及作用时间的增加,SCLC细胞系形态发生了变化,细胞增殖率减低。H69团状细胞减少,单个凋亡细胞增多;H446贴壁细胞减少,凋亡细胞增多,触角伸长,形状变得不规则;H526细胞体积缩小,由片状变为球形团块,周围散在大量凋亡细胞;DMS114由椭圆形变为长梭形,细胞内颗粒物增多,可见空泡,出现凋亡小体。由此可见,低剂量西达本胺即可影响SCLC细胞形态,促进细胞凋亡,四种细胞系对西达本胺均较为敏感。
西达本胺诱导SCLC细胞凋亡
流式结果显示,用不同浓度(0、IC20、IC50)西达本胺处理SCLC细胞系48 h后,四种亚型细胞系凋亡率均上升,且与加药浓度成正比,如图1-4 A所示。48 h检测在IC20、IC50浓度下H69细胞凋亡率为8.45%和14.46%,H446细胞凋亡率为8.88%和41.6%,H526细胞凋亡率为11.48%和20.77%,DMS114细胞凋亡率为11.83%和16.07%,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)(图1-4 B)。为了进一步检测西达本胺在H69、H446、H526、DMS114四种细胞系中的作用差异,我们用1 μmol/L的西达本胺分别处理H69、H446、H526、DMS114细胞48h后进行流式细胞仪检测,结果如图1-4 C所示,与DMS114比较,H69、H446、H526对西达本胺更敏感。
图不同浓度(0、IC20、IC50)西达本胺作用48 h后H69、H446、H526、DMS114细胞凋亡率柱状图
. 1 μmol /L西达本胺作用48 h后对H69、H446、H526、DMS114细胞凋亡的影响
西达本胺抑制SCLC细胞克隆
用不同浓度(0、IC20、IC50)西达本胺处理SCLC细胞系48 h后,在细胞克隆第14天,镜下观察细胞克隆情况并拍照(图1-5 A),细胞单克隆数量随加药浓度增加而减少。各组细胞克隆形成率绘制成柱状图,如图1-5 B所示,随着加药浓度增加细胞克隆形成率逐渐减小,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。H446、DMS114细胞进行了平板克隆实验,随着加药浓度的增加,克隆数明显减少,结果如图所示。