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电转染影响因素2

lijing320323

2023/02/27

食品常规理化分析

2、脉冲过程
1）脉冲波形
脉冲波形主要分为两种：1、方波脉冲；2、指数递减波脉冲。
方波脉冲是指：电压瞬间升至预设电压，保持电压放电，然后瞬间终止放电。
一般哺乳动物细胞电转染时选择方波脉冲，有较高的转染效率和细胞存活率。
指数递减波脉冲是指：先对电容充电，然后让电容完全放电，其电压变化呈指数递减。一般这种波形的脉冲电转染适用于细菌、酵母菌、昆虫细胞。
2）脉冲时间
脉冲时间的选定主要取决与脉冲波形。在方波脉冲中，脉冲时间可直接设定。在指数递减波脉冲中，脉冲时间是指电压衰减至初始电压1/3时所用的时间，等于电容（C）与电阻（R）的乘积，单位是ms。在参数优化中，增加电压应当降低脉冲时间，而减小电压则应当增大脉冲时间。
3）脉冲次数
一般而言，对于大多数细胞类型都选择单次脉冲。而在有些情况下可能会用到多次脉冲，因为低电压、短脉冲时间、多次脉冲可有效避免细胞损伤。多次脉冲建议中间间隔1min。

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