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电转染影响因素2
lijing320323
2023/02/27
私聊
食品常规理化分析
2、脉冲过程
1)脉冲波形
脉冲波形主要分为两种:1、方波脉冲;2、指数递减波脉冲。
方波脉冲是指:电压瞬间升至预设电压,保持电压放电,然后瞬间终止放电。
一般哺乳动物细胞电转染时选择方波脉冲,有较高的转染效率和细胞存活率。
指数递减波脉冲是指:先对电容充电,然后让电容完全放电,其电压变化呈指数递减。一般这种波形的脉冲电转染适用于细菌、酵母菌、昆虫细胞。
2)脉冲时间
脉冲时间的选定主要取决与脉冲波形。在方波脉冲中,脉冲时间可直接设定。在指数递减波脉冲中,脉冲时间是指电压衰减至初始电压1/3时所用的时间,等于电容(C)与电阻(R)的乘积,单位是ms。在参数优化中,增加电压应当降低脉冲时间,而减小电压则应当增大脉冲时间。
3)脉冲次数
一般而言,对于大多数细胞类型都选择单次脉冲。而在有些情况下可能会用到多次脉冲,因为低电压、短脉冲时间、多次脉冲可有效避免细胞损伤。多次脉冲建议中间间隔1min。
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