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红霉素回收率特别低

Ins_5ce2ab44

2023/05/25

液质联用（LCMS）

过柱淋洗是12ml水，洗脱是9ml甲醇，氮吹到剩一点，回收率做出来只有1%，这是什么原因？标曲里面红霉素没有问题。

分
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hujiangtao

第1楼2023/05/26

应助达人

先用标准品直接过SPE小柱测试一下柱效，如果回收率没问题，再从提取试剂方面考虑；如果标准品直接过柱回收率就不高，那就得先优化SPE程序，或者换别的SPE小柱

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Ins_5ce2ab44

第2楼2023/05/26

老师，能详细讲讲标准品过柱吗？
hujiangtao(hujiangtao) 发表:先用标准品直接过SPE小柱测试一下柱效，如果回收率没问题，再从提取试剂方面考虑；如果标准品直接过柱回收率就不高，那就得先优化SPE程序，或者换别的SPE小柱

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hujiangtao

第3楼2023/05/26

应助达人

就是把标准品加到spe上样前的试剂中，然后按正常spe程序活化上样淋洗洗脱上机看回收率
Ins_5ce2ab44(Ins_5ce2ab44) 发表:老师，能详细讲讲标准品过柱吗？

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Ins_5ce2ab44

第4楼2023/05/26

就是单独的红霉素做加标回收吗？
hujiangtao(hujiangtao) 发表:就是把标准品加到spe上样前的试剂中，然后按正常spe程序活化上样淋洗洗脱上机看回收率

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hujiangtao

第5楼2023/05/26

应助达人

对，不用加到样品里，把红霉素加到spe上样前的溶剂中就行
Ins_5ce2ab44(Ins_5ce2ab44) 发表:就是单独的红霉素做加标回收吗？

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Ins_5ce2ab44

第6楼2023/05/26

好的，我试一下，谢谢老师。
hujiangtao(hujiangtao) 发表:对，不用加到样品里，把红霉素加到spe上样前的溶剂中就行

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yzguo

第7楼2023/05/27

小柱怎么样？

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Ins_5ce2ab44

第8楼2023/05/27

吸附别的都正常用的waters 的HLB柱
yzguo(yzguo) 发表:小柱怎么样？

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Ins_5ce2ab44

第9楼2023/05/27

查阅文献发现了可能的原因，可能是因为我pH调成3，调太低了，红霉素在pH小于4的时候，分解成脱水红霉素。

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jjiang2

第10楼2023/05/27

SPE操作正确？

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