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【我们不一YOUNG】+制备分离过程中的问题
通标小菜鸟
2024/07/27
私聊
液相色谱(LC)
分离过程中遇到的问题挺多,本文筛选几个比较重要的讲一下:
1、样品必须要经滤膜过滤制备柱虽然规格变大了,但是填料的堆积密度基本上不会变,所以要和分析样品一样,样品溶于适当溶剂经过滤后方可以进样。
2、注意设备定量环大小分析
液相
现在大部分都有自动进样器,可以不会手动进样了,导致很多人会忽略定量环的概念。
制备
液相
进样前必须观察定量环时多大的,比如10 ml,表明腔体最多只有10ml的储量,多余会通过废液排出。
所以如果收率不对,可以在这上面想想。3、注意分离过程中的压力变化压力是否稳定,对分离非常重要,即使是波动也最好不要超过量程的80%(个人观点),否则长时间可能就会有危险。我个人分样品的时候就发生过泵停现象。主要也是因为自己太懒,没有连续观察柱压的变化。有时候关注到了,又以为没事,搞到最后不得不用减小流量,增大良性溶剂,加热等等手段去疏通,挺麻烦的!4、进柱子前要加柱头加柱头的作用想必不用说了,便宜啊!毕竟一根制备柱的价格都要上万,如果堵住了那真是太麻烦了,如果加一个柱头不放心,建议你可以加两个。
不要学偷懒,偷懒的代价后面能折腾死你!
5、分析系统基线噪音问题制备
液相
不可能像分析
液相
那么精细,系统基线噪音我建议不要管他,因为有时候你确定不了是噪音,还是小的杂质;我们的主产物一般都是有很高的吸收强度的,照重点阶段接收就好了。
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