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【“仪”起享奥运】+培养材料的消毒灭菌

通标小菜鸟

2024/07/31

前处理综合讨论

采自动物机体的实验材料，携带着微生物及杂质，接种前须进行表面消毒灭菌，对内部已受微生物侵染的材料应予以淘汰。

从动物机体采集的某些组织块，需要用消毒剂进行浸泡处理，进行表面消毒。常用消毒剂有过氧化氢(10~12%，浸泡5~15min)、过氧乙酸(0.05%，浸泡30s~1min)、酒精(70~75%，浸泡2min)。

灭菌程序验证内容

1.撰写验证方案及制定评估标准。

2.确认灭菌设备技术资料齐全、安装正确，并能处于正常运行。

3.确认关键设备控制仪表在规定的参数范围内能正常运行。

4.采用被灭菌物品或模拟物品进行重复实验确认灭菌效果符合规定。

5.完善文件记录，撰写验证报告。

灭菌程序运行监控

1.关键参数应在验证确定的范围内：温度、压力、时间、湿度、灭菌气体浓度、辐照剂量等。

2.灭菌程序定期验证，时效不超过半年。

3.灭菌设备或程序发生变更重新进行验证。

灭菌保证

1.灭菌效果与灭菌前产品污染程度及污染菌特性有关，把握微生物污染水平及污染菌耐受性，注意各个环节降低污染程度。

2.灭菌冷却阶段防止已灭菌物品再次污染。

3.适用生物指示剂、化学指示剂等监控灭菌结果

生物指示剂

基本要求：

1.菌种的耐受性应大于需灭菌产品中所有可能污染菌的耐受性。

2.菌种应无致病性。

3.菌株应稳定，存活期长，易于保存。

4.易于培养。若使用休眠孢子，孢子含量在90%以上。

常用生物指示剂

1.湿热灭菌：嗜热脂肪芽孢杆菌孢子（ATCC7953等，活孢子数为5×

10^⁵-5×10^⁶个/片)

2.干热灭菌：枯草芽孢杆菌孢子（ATCC9372等，活孢子数为5×10^⁵-5×10^⁶个/片)

3.辐射灭菌：短小芽孢杆菌孢子（ATCC27142等，活孢子数为5×10^⁷-5×10^⁸个/片)

4.气体灭菌：

（1）环氧乙烷灭菌：枯草芽孢杆菌孢子（ATCC9372等，活孢子数为5×10^⁵-5×10^⁶个/片)

（2）气态过氧化氢灭菌：嗜热脂肪芽孢杆菌孢子（ATCC7953等，活孢子数为1×10^⁶-5×10^⁶个/片)

（3）过滤除菌法：缺陷假单胞菌（ATCC19146等）。

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