中药颗粒剂检验方法优化

上党之巅

2024/08/22
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中药/天然药检测

中药颗粒剂检验方法优化

某某颗粒是由地黄、玄参、赤芍、牡丹皮、石膏、大青叶、连翘、蒲公英、建曲、甘草经水提制得。依据处方君臣佐使原则，对君药连翘中连翘苷进行检测，连翘苷成分在本品中稳定，可作为本品含量测定指标成分。该检测方法是参考《中国药典》2020年版一部连翘项下连翘苷含量测定方法进行优化，并对其进行验证，验证的项目有系统适用性与专属性、线性与范围、准确度、重复性、中间精密度、溶液稳定性、耐用性，所验证的方法将用于本品连翘苷含量检测。

方法1：

（1）色谱条件

色谱柱：Agilent C18 (4.6mm×250mm，5μm)

流动相：乙腈-水（25:75）

波长：277nm

流速：1.0ml/min

柱温：25℃

进样量：10μl

（2）溶液配制：

对照品溶液：取连翘苷对照品约4mg，精密称定，置20ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度约为0.2mg/ml）

供试品溶液：本品研细，取约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10ml，密塞，称定重量，超声处理（功率500W，频率40kHz）25分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

（3）结果

图1：方法1对照品溶液图谱

图2：方法1供试品溶液图谱

（4）结论

液相色谱峰中，供试品中连翘苷峰面积与相邻峰的分离度为1.26，应大于1.5，故需优化方法。

方法2：

（一）方法确定

（1）色谱条件

流动相：乙腈-水（18:82）柱温：35℃

其余同“方法1”项下

（2）溶液配制：

对照品溶液：使用“方法1”项下所配。（浓度约为0.2mg/ml）

供试品溶液：配置同“方法1”项下。

（3）结果

图3：方法2对照品溶液图谱

图4：方法2供试品溶液图谱

（4）结论

液相色谱图中，对照品峰面积21.153，供试品峰面积38.131，供试品溶液色谱图中，主峰与相邻杂质峰之间分离度为4.79，大于1.5；主峰理论板数7866，不低于3000；拖尾因子1.21，不大于2.0。

（二）供试品溶液浓度筛选：

在“方法2”条件下，对供试品浓度进行考察。

供试品溶液（1）：本品研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10ml，密塞，称定重量，超声处理（功率500W，频率40kHz）25分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

供试品溶液（2）：本品研细，取约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10ml，密塞，称定重量，超声处理（功率500W，频率40kHz）25分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

供试品溶液（3）：本品研细，取约3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10ml，密塞，称定重量，超声处理（功率500W，频率40kHz）25分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

检测结果如下：

名称	称样量g	浓度g/ml	峰面积		平均峰面积	含量mg/g	平均含量mg/g
供试品溶液（1）	1.0056	0.1006	11.665	11.772	11.719	1.093	1.09
供试品溶液（1）	1.0057	0.1006	11.779	11.727	11.753	1.096	1.09
供试品溶液（2）	2.0065	0.2006	22.785	23.151	22.968	1.074	1.08
供试品溶液（2）	2.0072	0.2007	22.911	23.247	23.079	1.079	1.08
供试品溶液（3）	3.0041	0.3004	33.652	34.556	34.104	1.065	1.07
供试品溶液（3）	3.0047	0.3005	34.559	34.067	34.313	1.071	1.07