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安捷伦1260液相软件操作SOP-采集数据

液相色谱(LC)

  • 利用液相色谱分析一个样品,我们要在软件上建立一个分析方法,然后保存这个方法,换好流动相,平衡好色谱柱后,再运行这个方法即可得到我们要的数据。

    一、建立分析方法

    方法建立的途径:① 可以调用已有的方法进行修改,然后再另存。② 也可以新建一个新的空白方法,再保存。③ 还可以通过编辑完整方法来创建新方法(可以在运行样品时,从脱机软件上进行完整方法编辑并保存)。

    开启联机工作站, 点击“方法和运行控制”,我们看到进样器、泵、TCC(柱温箱)、DAD(检测器)四个模块。
    最后点击“运行方法”即可。看到联机后有的模平衡色谱柱的同时,我们可以继续设置相应的参数各通道流动相的名称、每一针的时长、梯度设置。

    2.进样器设置

    右键单击进样器模块的空白处,选择“方法”,设置进样量、进样方式(标准进样/洗针后进样)。状态显示黄色(未就绪)
    可以点击右下方的“打开”键启动各个模块。

    1.泵设
    换所用通道的流动相:把各通道吸液管路放进准备好的流动相中,逆时针旋开泵模块上的溶液排空阀右键单击泵模块的空白处,选择“方法”,设置“流速”为 4ml/min,分别将用到的各通道设置成100%进行置换,每个通道置换2~4min。

    流动相换好后,顺时针旋紧排空阀,连接好色谱柱,设置好流速和初始流动相比例,进行色谱柱平衡。 平衡色谱柱的同时,我们可以继续设置相应的参数,各通道流动相的名称、每一针的时长、梯度设置。 2.进样器设置

    右键单击进样器模块的空白处,选择“方法”,设置进样量、进样方式(标准进样/洗针后进样)。 3.柱温箱设置

    右键单击TCC模块的空白处,选择“方法”,设置左侧和右侧温度,需要低温的话,只能冷却到比环境温度低 10 ℃的温度。 4.检测器的设置

    右键单击DAD模块的空白处,选择“方法”,①勾选并设置一或多个波长;②如果需要全波长的光谱数据,那么选择存储“全部”,③并设置波长扫描范围。④开启紫外光灯或可
    见光灯。 设置好以上参数后,点击菜单栏的“方法”,另存方法并命名。 如果在运行方法过程要建立新方法,在脱机工作站中编辑完整方法:点击“方法和运行控制”,菜单栏“方法”下“编辑完整方法”,根据向导设置各个模块的参数,最后保存即可。
    二、运行方法或运行序列。

    1.运行方法(单针进样)

    点击菜单栏“运行控制”,如果样品信息和存储路径已设置好,那直接点击“运行方法”即可。 如果没设置好,点击“样品信息”,设置数据存储路径、样品瓶位置和样品名称等信息。


    最后点击“运行方法”即可。 2.运行序列(多针进样)

    点击“序列”,打开“序列参数”,设置数据存储目录;在②处是设置开启新方法后的等待时间,也就是平衡色谱柱的时间;③处是设置序列结束后的操作命令:1)standby(待机,关闭泵、柱温箱、灯),2)lamp all off(仅关灯),3)pump all off(仅关泵)。 再打开”序列表“,添加序列,每一行设置一个样品位置、调出对应方法、每瓶进样次数、保存的数据文件名。

    保存序列后即可点击序列表右下方的“运行序列”开始运行。
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