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如何选择内标和确定内标浓度

  • 萧翊柏
    2024/09/03
    农检联合队
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 1. 内标的选择

    结构相似性: 内标的化学结构应尽可能与目标分析物相似,这样可以确保内标和分析物在色谱和质谱上的行为相似。理想情况下,选择同位素标记的内标(如^13C或^2H标记的化合物),因为它们与目标分析物在化学性质上几乎一致,但在质谱上可以区分开来。

    化学稳定性: 内标应具有良好的化学稳定性,不会在分析过程中分解或与样品中的其他成分发生反应。

    无内源性干扰: 选择的内标不应在样品基质中天然存在,否则会干扰定量分析。

    质谱响应一致性: 内标应在质谱检测器上有稳定且强的响应,且响应应与目标分析物在相似的离子化条件下保持线性关系。



    2. 内标浓度的确定

    线性范围: 内标浓度应处于目标分析物线性检测范围内。通常情况下,内标浓度选定为目标分析物浓度的中间值,以确保内标和分析物的响应比值在检测器的线性范围内。

    精确度和精密度: 内标浓度应选择在确保仪器检测器的信号噪声比(S/N)较高的位置,从而提高测量的精确度和精密度。

    样品基质效应: 考虑样品基质对内标和分析物响应的可能影响。内标浓度的选择应尽量减少基质效应的影响,确保内标能有效校正样品基质引起的信号变化。

    实验优化: 通过实验优化内标浓度。通常,初步实验可以选择几个不同的内标浓度进行检测,分析响应信号和线性关系,选择最适合的浓度。



    3. 实验验证

    校准曲线: 使用选择的内标浓度制作一系列已知浓度的校准曲线,并检查线性关系。如果校准曲线的线性关系良好(R2值接近1),说明内标浓度选择合理。

    回收率测试: 通过加入已知量的内标到样品中,进行回收率测试,以确保内标能够正确反映样品中的分析物浓度。

    质控样品: 定期使用质控样品检测方法的重复性和精度,以确保内标和分析物的响应比值稳定。

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  • avih1981

    第1楼2024/09/09

    应助达人

    内标物很难找的。总结的很好。

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  • zyl3367898

    第2楼2024/09/09

    应助达人

    内标物浓度是固定的。

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  • m3316431

    第3楼2024/09/09

    根据标准来选择内标

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  • zyl3367898

    第4楼2024/09/10

    应助达人

    气质联用仪用的是内标法。

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  • hujiangtao

    第5楼2024/09/10

    应助达人

    液质首选同位素内标

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  • zhangyongmei

    第6楼2024/09/10

    内标最好选择同位素内标,实在找不到同位素内标可以选择性质相似的物质作为内标,内标的浓度我们一般根据仪器来定,还有就是物质的响应,一般在仪器的50倍定量限左右。

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  • 光风霁月

    第7楼2024/09/18

    内标不好选择,要用质控来控制数据结果。

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  • Insm_1b83ba3

    第8楼2024/09/18

    总结的很好,值得借鉴

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