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以叶黄素为例谈开发长链小分子化合物LCMS方法
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2024/09/18
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液质联用(LCMS)
以叶黄素为例谈开发长链小分子化合物
LCMS
方法
小分子 蛋白/多肽
长链小分子化合物
1.小分子本文描述小分子一般指分子量低于1000的化合物,为啥不讨论大分子化合物?因为APCI不太适合做蛋白/多肽等大分子。
ESI离子源(thermo) APCI离子源(rhermo)
2.常用
LCMS
离子源有ESI和APCI两大类型,做小分子方法一般情况都是ESI使用频率比较高,至于具体俩种类型离子源差异有兴趣可以百度一下(实在不想凑字数)。
常用四级杆有三重四级杆
液质
、单四级杆
液质
开发长链小分子化合物
LCMS
方法常遇到以下两个难点:
A.ESI源下注定响应不高
B.峰型不太理想
ESI源下响应低的情况几乎是肉眼可预见,长链小分子化合物大多带电位点少,就导致该类型化合物电离效率低,所以ESI源下响应就不会太高,而且某些特殊的长链小分子化合物ESI 源下还存在响应不稳定的情况(例如大部分类胡萝卜素)。针对此类情况其实更换APCI源就能很好的解决,此类化合物一般在APCI源下有稳定且较高的响应,在较高的响应下解决其他问题会比较方便,此策略可应用于多数带电位点少化合物。
乙腈水下长链小分子化合物很难有正常峰型
使用异丙醇/甲醇-乙腈水流动相下化合物得到较好峰型
长链小分子化合物的结构直接导致此类化合物峰型不理想。链长,带氧官能团少,按常规的乙腈水去跑很可能就是一个鼓包,没有峰型,在流动相中添加适当比例的异丙醇,就能得到该化合物较好的峰型,对化合物的定性定量都有帮助。
以叶黄素为例谈开发长链小分子化合物
LCMS
方法
小分子 蛋白/多肽
长链小分子化合物
1.小分子本文描述小分子一般指分子量低于1000的化合物,为啥不讨论大分子化合物?因为APCI不太适合做蛋白/多肽等大分子。
ESI离子源(thermo) APCI离子源(rhermo)
2.常用
LCMS
离子源有ESI和APCI两大类型,做小分子方法一般情况都是ESI使用频率比较高,至于具体俩种类型离子源差异有兴趣可以百度一下(实在不想凑字数)。
常用四级杆有三重四级杆
液质
、单四级杆
液质
开发长链小分子化合物
LCMS
方法常遇到以下两个难点:
A.ESI源下注定响应不高
B.峰型不太理想
ESI源下响应低的情况几乎是肉眼可预见,长链小分子化合物大多带电位点少,就导致该类型化合物电离效率低,所以ESI源下响应就不会太高,而且某些特殊的长链小分子化合物ESI 源下还存在响应不稳定的情况(例如大部分类胡萝卜素)。针对此类情况其实更换APCI源就能很好的解决,此类化合物一般在APCI源下有稳定且较高的响应,在较高的响应下解决其他问题会比较方便,此策略可应用于多数带电位点少化合物。
乙腈水下长链小分子化合物很难有正常峰型
使用异丙醇/甲醇-乙腈水流动相下化合物得到较好峰型
长链小分子化合物的结构直接导致此类化合物峰型不理想。链长,带氧官能团少,按常规的乙腈水去跑很可能就是一个鼓包,没有峰型,在流动相中添加适当比例的异丙醇,就能得到该化合物较好的峰型,对化合物的定性定量都有帮助。
叶黄素就是定型的长链小分子化合物,在使用乙腈水+ESI源时虽然也能找到母离子和对应子离子,但是峰型巨丑,稳定性也不理想,方法完全不能进行正常测样。更换APCI并在流动相中添加异丙醇后其峰型得到明显改善,方法得到极大改进,经验证此方法稳定性正常,能满足正常检测活动使用。
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