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【金秋计划】固本泻浊汤通过Raf1/p-Elk1信号轴抑制M1极化,减轻肾间质纤维化
城头变幻大王骑
2024/09/04
私聊
中药/天然药检测
固本泻浊汤(GBXZD)
是一种在中医指导下用于治疗
慢性肾脏疾病(CKD)
的复方中药,其主要成分为黄芪、党参、积雪草、丹参、菟丝子、大黄。临床研究表明,GBXZD可缓解患者疲劳、恶心等症状,改善肾功能;但其具体作用机制还有待进一步阐明。
肾间质纤维化(RIF)
是各种CKD的最终特征性表现,无法治愈,需要进一步探索合适的治疗方法来延缓其进展。GBXZD在临床上广泛应用于RIF治疗,可有效缓解CKD患者的症状。然而,GBXZD在RIF中的具体作用机制尚不清楚,需要进一步研究。该研究旨在通过对
M1巨噬细胞
的调控,探讨GBXZD对RIF的特异性作用。
通过单侧输尿管梗阻(UUO)建立体内RIF模型,将SD大鼠随机分为假手术、UUO、UUO + GBXZD -低剂量组(GBXZD-L)和UUO + GBXZD -高剂量组(GBXZD-H)。
采用苏木精和伊红(HE)染色及Masson染色观察大鼠肾脏的病理变化。
免疫
组化法检测大鼠肾组织中Ⅰ型胶原(COL I)、纤维连接蛋白(FN)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)的表达,免疫荧光法检测CD86和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。
体外实验采用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7
巨噬细胞M1极化模型
。细胞分为对照组、LPS组、LPS + GBXZD低剂量组(GBXZD-L)和LPS + GBXZD高剂量组(GBXZD-H)。采用western blotting、流式细胞术、免疫荧光和酶联免疫吸附法(ELISA)检测CD86、iNOS、IL-1β、IL-6和TNF-α的表达变化。利用抗体芯片分析了GBXZD调节巨噬细胞M1极化的作用途径,并用western blotting对结果进行了验证。
组织病理学结果显示,与假手术组相比,UUO组表现出明显的纤维化损伤。治疗后肾损伤程度、RIF、炎症因子表达均低于UUO组。与LPS处理的细胞相比,LPS + GBXZD处理的RAW 264.7细胞M1标记物CD86、iNOS和通路蛋白
Raf1、p-Elk1
的表达下调。LPS组炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达均高于对照组。然而,与LPS组相比,GBXZD-H组这些因子的水平显著降低。
该研究表明,
GBXZD改善RIF,抑制炎症反应和巨噬细胞M1极化的可能机制与下调Raf1和p-Elk1有关
。因此,GBXZD对CKD患者具有潜在的治疗价值。
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