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【金秋计划】金匮肾气丸通过MHC II类分子减轻小鼠糖尿病肾病纤维化
城头变幻大王骑
2024/09/04
私聊
中药/天然药检测
金匮肾气丸(JGSQW)
是一种传统的中药配方,传统上用于缓解
泌尿系统疾病
,如尿频和多尿。临床研究表明,JGSQW与降糖药物联用时具有协同作用,可改善
糖尿病
肾病(DN)
,但其作用机制和作用靶点尚不清楚。
采用DN
db /db小鼠
模型,探讨中药金匮肾气丸的治疗作用及其机制。
采用超高效
液相色谱
-质谱联用技术对复方金匮肾气丸的主要活性成分、血药浓度和药动学进行分析。此外,采用db/db小鼠模型研究了JGSQW和
二甲双胍
对糖尿病肾病小鼠血糖水平、血脂水平、肾功能和肾脏病理的治疗作用。蛋白质组学分析确定了JGSQW治疗DN的主要靶点。
免疫印迹
、免疫组织化学和免疫荧光验证了其作用机制。然后通过分子对接和分子动力学、转染、药物亲和反应靶稳定性(DARTS)实验和细胞热迁移实验(CETSA)进一步验证了靶向结合效果。
JGSQW联合二甲双胍可显著改善DN小鼠的血糖水平、血脂、肾功能和肾脏病理。JGSQW主要通过靶向主要组织相容性复合体II类
(MHC II类)分子
发挥其对DN的治疗作用。免疫组化结果显示,JGSQW抑制I型胶原、纤维连接蛋白和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。免疫荧光和Western blot结果显示,JGSQW抑制MHC II类分子H2-Ab1和H2-Aa的表达,从而抑制CD4+ T细胞浸润,改善糖尿病
肾纤维化
。
芍药苷与H2-Aa的结合能力
通过分子、DARTS和CETSA检测进行了预测和验证。80 μM芍药苷可有效减轻高糖诱导的MPC-5损伤模型。在此模型浓度下,H2-Aa过表达,Western blotting进一步证实
芍药苷通过调节H2-Aa减轻肾小球足细胞纤维化
。
结论
JGSQW联合二甲双胍可能通过下调免疫复合物MHC II类分子,减弱MHC II类对CD4的抗原递呈作用,具有协同缓解糖尿病肾病肾纤维化的作用。
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