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【金秋计划】丹参酮IIA通过调节巨噬细胞的胞葬作用减轻LDLR-/-小鼠动脉粥样硬化

城头变幻大王骑

2024/09/05

中药/天然药检测

丹参酮IIA (TIIA)是中药丹参的主要脂溶性活性成分，具有延缓动脉粥样硬化(AS)的作用。TIIA还可以通过发挥抗炎和抗氧化作用来治疗帕金森病等神经系统疾病。然而，目前尚不清楚TIIA是否可以通过调节胞葬作用(efferocytosis)从而改善动脉粥样硬化。

该研究旨在确定TIIA是否可以通过增强胞葬作用来减少脂质积累和治疗AS。

首先，对LDLR敲除(LDLR-/-)小鼠进行为期24周的体内实验，分别采用组织病理学染色、免疫荧光和Western blot实验从疗效和机制两部分进行验证；此外，利用细胞在体外再次验证。具体实验设计方案如下：在体内，以西方饮食（高脂肪饮食）喂养12周的LDLR-/-小鼠为AS模型，以正常饮食喂养的LDLR-/-小鼠为空白对照组。TIIA组和阳性对照组(阿托伐他汀，ATO)分别通过腹腔注射(15 mg/kg/d)和灌胃(1.3 mg/kg/d)干预12周。体外分别用ox-LDL (50 ug/mL)或ox-LDL (50 ug/mL) + TIIA (20 uM/L或40 uM/L)培养RAW264.7细胞。

采用Masson染色和油红O染色分别评价主动脉斑块和RAW264.7细胞泡沫细胞形成的病理变化。采用生化方法检测小鼠血脂水平。采用免疫荧光法检测斑块中凋亡细胞和胞葬作用相关信号的表达。采用RT-qPCR和Western blot方法观察小鼠主动脉和RAW264.7细胞中胞葬作用相关分子的变化趋势。还使用中性红法评估RAW264.7细胞的吞噬能力。

与模型组比较，TIIA降低了血清TC、TG、LDL-C水平(p < 0.01)，减少了小鼠主动脉富含脂质斑块的相对管腔面积(p < 0.01)，增强了小鼠主动脉斑块的稳定性(p < 0.01)，减少了ox-LDL诱导的RAW264.7细胞脂质堆积(p < 0.01)，上调了ox-LDL诱导的RAW264.7细胞的胞葬作用相关分子表达，提高了胞葬作用率。

TIIA可能通过增强巨噬细胞的胞葬作用功能来减少脂质积累，从而治疗AS。继续深入研究TIIA使巨噬细胞在AS中保持强吞噬和消化吸收的具体机制，可能会推动TIIA作为巨噬细胞胞浆作用的靶向治疗剂的进展。

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