仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
评论
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
食品检测
>
食品毒素/微生物检测
>
帖子详情
【金秋计划】微生物菌种管理的相关流程
Ins_d8c51cc1
2024/09/09
私聊
食品毒素/微生物检测
1.1菌株的采集
实验室用菌种一是到国家法定机构采购,二是购买商业派生菌种,三是科研中菌种交流。不管是哪种来源,均统一采集。采集中严格按照规范执行。要求包装可靠,采集迅速,不泄漏不污染。保证菌种合格和环境安全。采集中要有菌种传代标识。选择有资质的标准菌株的合格供应商,每批标准菌株必须附带有供应商的合格证或检测报告或说明书,来证明所采购的标准菌株是合格的。
1.2标准菌株和验收
实验室收到标准菌株,首先应进行符合性感官检查,记录菌株号和标准菌株来源途径信息,确保溯源性清楚。同时还应记录标准菌株名称和数量、生产日期、接收日期和有无破损等情况。
1.3冻干标准菌株的复活
1.3.1开启产品包装:先用70%酒精棉擦拭外包装,再打开使用。
1.3.2复活:选择合适的培养基和培养条件(根据菌种使用说明书,见附录)进行复活。菌种的首次活化最好是在非选择性琼脂培养基上,除非特殊情况或特别推荐,一般不用液体培养基。冻干菌株的传代次数不得超过5代,从标准菌株保藏中心购买的冻干标准菌株为第0代。
1.4工作菌株确认方法及依据
用无菌接种环取上述培养物,在相应的培养基平板(营养琼脂、大豆胰蛋白胨琼脂)上或相应的细菌鉴别平板(如伊红美蓝、麦康凯、BP等上划线分离单个菌落,置适宜条件下培养(若该类微生物为厌氧菌,则培养条件应为厌氧条件)。以同样方法取真菌和酵母菌至SDA(萨布罗培养基)平板上或玫瑰红钠培养基平板上,23~28℃下培养7d;培养后观察是否具有典型的菌落状态,然后挑取单一纯菌落,进行革兰染色、镜检,观察其染色特征及菌体形态以确定菌种。
1.5 污染处理
假如在该平板上发现有其他菌落生长,则说明操作有污染或菌种不纯。要将
该污染培养物做灭菌处理,寻找原因,重新分离挑选纯菌落。
1.6菌种保存
所有菌种均由实验室专人(双人双锁)保存于专用冰箱或其它保存方式。要建立菌种登记台帐,详细记录菌种采集、保管、制备、使用、处置情况;每一种菌种一定要有检测鉴定报告(具体的的鉴定方法见菌种质量报告鉴定证书上的方法);
具体菌种保存方法一般为:
将复苏后肉汤与灭菌甘油按15%甘油比例(肉汤8.5mL+甘油1.5mL)混合,-30 ℃冻存,(可用2mL冻存管冻存多管),作为保藏储备菌株F1代,也可使用商品化的菌种保存管。
1.7菌种的传代
1.7.1标准菌株的复苏:
① 菌种操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染。
② 每次使用和复苏时只需将小珠在平板上滚动或置肉汤中培养。
1.7.2标准储备菌株每转接一次须进行确认。(确认方法一般为他们各自独有的形态,在鉴别培养基上的形态)
1.7.3工作菌株转接的方法:
①、配制营养琼脂培养基(溶血性弧菌加3%氯化钠 ),121℃高压灭菌15分钟后分装在试管内,冷却后备用。
②、在无菌条件下,用接种环挑取菌苔至新鲜试管上作“米”字形划线接种,放置在36℃的培养箱内培养24小时。
1.7.4工作菌株的使用
1.7.4.1内部质量控制:一个月一次阳性对照、培养基每批验收;
1.7.4.2外部质量控制:能力验证、实验室比对;
1.7.5工作菌株的期间核查
1.7.5.1期间核查的频率:每半年对使用标准菌株进行一次期间核查。
1.7.5.2工作菌株期间核查的方法及依据:同工作菌株的确认一样。
1.7.5.3建立标准菌株期间核查记录。
1.8菌种的标识和使用期限:
1.8.1标识:菌种代数的计算为干粉菌种为第0代,转接一次加一代。具体标识为:例单增李斯特氏菌第0代,标识为DZ-0,第一代标识为DZ-01第一代有12支,则DZ-01-01、……、DZ-01-12;并标明日期:如2016.02.13这样填写。
1.9 菌种的保藏
1.9.1将试管内菌种放入冰箱中2~8℃冷藏保存。
1.9.2将传代并经过培养后的菌种放入冰箱中2~8℃保存。每支保存菌种需标明菌名、标准编号、传次、传代日期。
1.10菌种的销毁
1.10.1菌种使用后或超过贮存期的应进行销毁。
1.10.2需销毁的菌种,应用高压蒸汽(121℃)灭菌30分钟。
1.10.3灭菌后,再进行清洗和处理。
1.10.4销毁的菌种应做好记录。销毁时由化验负责人监督销毁,保管人员负责销毁。
相关话题
1
【金秋计划】菌种衰退了怎么办?该怎么预防呢
2
【金秋计划】液体撞击式空间除菌测试过程中不可忽视的几点
近期热榜
【官方邀请】高效液相色谱使用情况有奖调研
【中秋佳节】 在一起月更圆!
一个“不符合”难住新领导
第三届微课大赛投票进行中ing
热门活动
第三届微课大赛投票进行中ing
【仪采通】仪器采购更轻松
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
微生物习题讨论(跟帖有奖)
讨论
2014/09/05
不锈钢过滤器凉茶抽样不过去?
2014/01/22
有人关注最近方舟子打假普洱茶黄曲霉素超标吗?
讨论
2017/09/07
酱腌菜营养胜过新鲜蔬菜
讨论
2014/05/28
蜡样芽孢杆菌显色培养基
分享
2011/08/19
【分享】全自动微生物鉴定系统在临床微生物检验中的应用
2010/03/20
菌落总数的概念
讨论
2014/12/12
【分享】臭氧与其他消毒设备的比较
2010/09/27
霉菌的计数
求助
2024/09/18
【金秋计划】液体撞击式空间除菌测试过程中不可忽视的几点
分享
2024/09/13
【金秋计划】菌种衰退了怎么办?该怎么预防呢
分享
2024/09/09
【金秋计划】微生物菌种管理的相关流程
分享
2024/09/09
【金秋计划】无菌检查法要点知识
分享
2024/09/09
【金秋计划】微生物内部质量控制之阳性加标
分享
2024/09/09
菌种保藏中心
原创
2024/09/08
【金秋计划】微生物检测方法
分享
2024/09/06
【金秋计划】当没有合适的基质时可以用标准加入法来试试看
第十七届原创
2024/09/13
原子吸收火焰法测定土壤中六价铬所用质控样值一直在衰减
求助
2024/09/12
基线(随机出现)突跃有哪些原因?
求助
2024/09/12
数据和结果
求助
2024/09/11
液质有什么好项目可以做
讨论
2024/09/11
关气瓶是先关总阀还是先关减压阀?
求助
2024/09/14
委托加工,条形码到底该用谁的?
求助
2024/09/13
恒温振荡器如何校准?
求助
2024/09/13
【金秋计划】无菌检查法要点知识
分享
2024/09/09
【金秋计划】微生物内部质量控制之阳性加标
分享
2024/09/09
便携式农残检测仪技术特点及应用优势
分享
2024/09/09
【金秋计划】空白试验值偏高的原因
分享
2024/09/09
安捷伦气相色谱8860堵塞
求助
2024/09/09
【金秋计划】如何选择合适的高压灭菌器灭菌程序
分享
2024/09/09
《GB/T 20771-2008 蜂蜜中486种农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》检出限查询Excel版
分享
2024/09/09
《GB/T 23211-2008 牛奶和奶粉中493种农药及相关化学品残留量的测定》检出限查询Excel版
分享
2024/09/09
品牌合作伙伴
研究月球土壤岛津助力郑大用户登Nature顶刊
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...