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色谱柱如何进行初始平衡

zhangyongmei

2024/10/24

液相色谱（LC）

通常，色谱柱出厂时保存于100%乙腈中。将色谱柱更换至其它流动相体系之前，务必要确保流动相的兼容性。为避免流动相缓冲液在色谱柱或色谱系统中析出，使用五倍柱体积的水/有机溶剂混合溶液冲洗色谱柱，其中有机溶剂含量与所需缓冲盐流动相的有机溶剂含量相同或更低(例如,使用60%的甲醇水溶液冲洗色谱柱和系统，然后再更换为60%甲醇/40%缓冲液的流动相)。对于反相分离来说，完成平衡至少用10倍柱体积的流动相(参见下表中的色谱柱体积)。当反压达到恒定且色谱柱基线稳定时，可认为该柱达到完全平衡。
注意! 如果流动相中的添加剂(如,离子对试剂)浓度较低(<0.2%v/v),那么完成平衡可能需要100-200倍柱体积的流动相。此外，当流动相中含有甲酸盐(如，甲酸铵、甲酸等)时,平衡时间可能会延长。
色谱柱体积表(mL)

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