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色谱柱的如何进行清洗及保存

zhangyongmei

2024/10/24

液相色谱（LC）

色谱柱峰形发生改变、色谱峰分叉、出现肩峰、保留时间漂移、分离度变化或背压升高，都表明色谱柱被污染了。用纯有机溶剂进行冲洗以去除非极性污染物,谨慎操作以避免任何缓冲盐的析出。如果冲洗不能解决问题,可采用以下步骤对色谱柱进行清洗和再生。
1、使用与样品性质和固定相类型(反相、正相或HILIC)相匹配的常规清洗方法，这有助于溶解可疑污染物。
2、在柱温45℃条件下,使用20倍柱体积的溶剂冲洗色谱柱。
3、如果使用的是反相色谱柱,依次以非极性逐渐增强的溶剂(如,水到甲醇到四氢呋喃*到二氯甲烷*)冲洗色谱柱。如果使用的是HILIC色谱柱，依次以极性逐渐增强的有机溶剂(如,乙腈到乙腈/甲醇到乙腈/水到水)冲洗色谱柱。
*注意: 对于某些有机溶剂，需要注意其与系统管路与真空脱气包的兼容性。
4、通过逆向冲洗程序，再返回初始流动相条件。

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