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关于定量PCR的光源问题

PCR

  • 由于我们要购买定量PCR仪，因此我查了一些资料。可是我对定量PCR仪的光源有点困惑。

    定量PCR仪用的光源总的来说分为两类：
    一类是用钨灯发光，再利用滤光片得到单色激发光。
    还有一类是用发光LED直接得到单色激发光。

    但是，我对发光LED的特性不是很了解，我总怀疑其波长的半宽度太大，有可能引起其他的激发，造成测量误差；另外，发光LED的发光效率如何，发光强度似乎也不是很稳定。

    我查了一些LED的资料也都没提到这两点。

    在此，我希望能有高人给予指点。
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  • 第1楼2004/12/10

    终于找到相关资料了。

    LED：
    1.谱线半宽度为20-30nm。
    2.峰值波长随温度升高而变大，约0.2nm/C。
    3.发射光强强烈的依赖环境温度，随温度升高而下降。

    滤光片：
    滤光片有两种，吸收滤光片和干涉滤光片。不知道一般的设备上用的是什么滤光片。
    吸收滤光片的半宽度一般较宽，通常在100nm左右。
    干涉滤光片的半宽度可以做的很窄，甚至到几个nm。但是价格较高。
    当温度升高时，滤光片的波长和半宽度也会发生变化，因此一般会在光源和滤光片之间增加一个隔热玻璃。

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