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【求助】进样后不出峰，怎么回事？

xutao0528

2007/08/20

液相色谱（LC）

我用的是ODS－3反相柱，流动相为40mmol，PH－4的磷酸缓冲液，在210nm处检测。樟脑磺酸怎么在进样后20分钟时也不出峰啊，只有几个特别小的杂质峰。样品是0.03g溶入100ml啊。请各位仁兄帮忙一下。是不是样品留在柱子里了？倒是用甲醇洗柱时会有峰出来，我测的样是这种有机酸和氨基酸的混合物，我该怎么办呢？

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lenovο

第1楼2007/08/20

样品不出峰的情况有多种原因，例如：
1 有些样品遇到一定的因素会分解挥发；
2 样品浓度太低；
2 样品不吸收紫外光；
4 柱子堵了；
5 进样器或其后面的管路漏了；
6 保留时间太长，还没到出峰时间，另外保留时间越长，峰越低；
....

0

tianru的爸爸

第2楼2007/08/20

增加流动相中的甲醇的浓度，可能是因为你的流动相的极性不够。

0

xiaoluo218

第3楼2007/08/20

同意二楼的意见，你一个去排除看啊

0

robinfire

第4楼2007/08/20

用纯甲醇冲一次柱子，看有没有东西。
有的话，加大甲醇浓度。

0

ericwong

第5楼2007/08/20

用甲醇冲，可以出峰。那么就改变一下流动相试试吧

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tanggangfeng

第6楼2007/08/20

可能进样太少了。樟脑磺酸即使在210nm紫外也很弱的，建议浓度大点。
xutao0528 发表:我用的是ODS－3反相柱，流动相为40mmol，PH－4的磷酸缓冲液，在210nm处检测。樟脑磺酸怎么在进样后20分钟时也不出峰啊，只有几个特别小的杂质峰。样品是0.03g溶入100ml啊。请各位仁兄帮忙一下。是不是样品留在柱子里了？倒是用甲醇洗柱时会有峰出来，我测的样是这种有机酸和氨基酸的混合物，我该怎么办呢？

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深海的海豚

第7楼2007/08/20

这个样品，这种浓度，之前有没有做过？
20分钟之后情况如何？放大浓度结果如何？
样品使用什么方式溶解？
从最后一句话看来，最好先把甲醇比例增大一些比较好。
xutao0528 发表:我用的是ODS－3反相柱，流动相为40mmol，PH－4的磷酸缓冲液，在210nm处检测。樟脑磺酸怎么在进样后20分钟时也不出峰啊，只有几个特别小的杂质峰。样品是0.03g溶入100ml啊。请各位仁兄帮忙一下。是不是样品留在柱子里了？倒是用甲醇洗柱时会有峰出来，我测的样是这种有机酸和氨基酸的混合物，我该怎么办呢？

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