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多肽药物的液相分析,流动相一般都是什么啊?检测波长呢?
在反相色谱分析多肽含量时,流动相常用三氟乙酸,而不用磷酸、乙酸或分子量很小的甲酸呢?三氟乙酸起到了离子对试剂的作用了吗?
我现在的流动相是A---ACN 5%, 水 95% 和0.05% TFA B---ACN 80%, 水 20% 和0.04% TFA,在采用NSI的情况下(已经考虑调整电压和喷头位置等情况),当流动相B的比例在低于60%时,喷头总是断断续续出现气泡和液滴,喷雾状况差,信号断断续续(出喷雾时信号强度还可以,但喷雾就是不连续),咨询技术支持说只能用纯有机相冲,但是冲完再做样品时还是遇到同样的情况;在此想请问朋友们在不影响液相对成分的分离效果情况下(我做的是复杂多肽的分离)流动相的组成方面是否可以做些修改,比如添加某些特殊物质,使其尽量少产生气泡,提高喷雾的连续性?[color=#DC143C]最新进展 [/color] 非常感谢各位有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]经验的朋友提供的建议! 我更换了流动相:A---5% ACN, 95% 水和 0.1% FA;B---95% ACN,5% 水和 0.1% FA 我用B冲洗了15min后在40min内使B从100%梯度降低至0,之后一直维持A为100%,我注意观察了近20min,喷雾偶尔会有暂停,总体情况比之前好多了; 然后我又走空样,按平时正常的梯度做了一个循环,在B梯度升高、维持、降为0之后,喷雾也还能维持得不错(离子注入时间值和信号强度值都挺不错) 现在我想重复几个空样循环,看它是否仍然稳定