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【求助】在线等待救援:梯度出现倒峰和基线下滑至-2000多mAU

  • liujieqing20011
    2007/11/18
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 用乙睛:0.8%乙酸水梯度洗脱,206nm,1ml/min,谱图如附件。请问出现这个现象的原因是什么?亟待回答!!!谢谢!!!!
    谱图

附件:

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  • 闲鹤野云

    第1楼2007/11/18

    基线向下漂移。信号衰减可以调节一下看看。现在人少,你再耐心等待一会。

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  • xiaomity

    第3楼2007/11/18

    属于正常现象,要等待它回到基线

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  • liujieqing20011

    第4楼2007/11/18

    进样前没有这个现象啊,就是梯度了财有的,等它回到基线都跑完了。
    我试试把有机相中也加乙酸。谢谢你们!

    xiaomity 发表:属于正常现象,要等待它回到基线

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  • Mix_Grey

    第5楼2007/11/18

    你选择了206nm作为检测波长,低波长的地方由于你流动相中乙睛比例的变化必然导致吸收的变化,乙睛在210以下有吸收.为了消除这个现象,建议在可能的情况下,选择260nm以上的波长为检测波长.

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  • liujieqing20011

    第6楼2007/11/18

    请教一下2楼dindin,我用这个梯度的时候跑基线怎么都跑不平,都在5左右波动,这是什么原因呢?谢谢

    dindin 发表:是因为流动相中乙酸含量随梯度逐渐减小所致,可以尝试在水相和有机相中加相同比例的乙酸,基线下滑会有所改善.

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  • liujieqing20011

    第7楼2007/11/18

    可我要测定皂苷的含量,皂苷在260nm没有吸收,只在210以内才有。有什么好的建议么?

    wuyinghao 发表:你选择了206nm作为检测波长,低波长的地方由于你流动相中乙睛比例的变化必然导致吸收的变化,乙睛在210以下有吸收.为了消除这个现象,建议在可能的情况下,选择260nm以上的波长为检测波长.

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  • Mix_Grey

    第8楼2007/11/18

    建议你将色谱条件做以下2种中的一种改动:
    1. 将乙酸改为磷酸.
    2. 采用下列流动相:CH3CN-50mmol/L KH2P04·H20(20:80),二元梯度洗脱;流速:1. 0 mL/min;UV检测器,检测波长203 nm。梯度比例可以按实际情况设置,原则是能将所有组分在较短时间完全分开并洗脱出来.

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  • liujieqing20011

    第9楼2007/11/18

    您说的20:80和二元梯度我不太明白,是不是可以用等度20:80比例或者用梯度洗脱呢 ?谢谢指点!

    wuyinghao 发表:建议你将色谱条件做以下2种中的一种改动:
    1. 将乙酸改为磷酸.
    2. 采用下列流动相:CH3CN-50mmol/L KH2P04·H20(20:80),二元梯度洗脱;流速:1. 0 mL/min;UV检测器,检测波长203 nm。梯度比例可以按实际情况设置,原则是能将所有组分在较短时间完全分开并洗脱出来.

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  • wubaicang2003

    第10楼2007/11/19

    [quote]原文由 xiaomity 发表:属于正常现象,要等待它回到基线,只要系统不漏液,做梯度洗脱有时基线就是难稳

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  • yingxk

    第11楼2009/12/20

    实验 的室内环境变化,,,关闭空调又不行,调节空调方向,,,最好尽量做至室 温恒温,具体温度波动小于多少度,我没 有数据,你可以试试排除

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