【求助】反相高效液相色谱出峰顺序

出峰顺序和组分的性质是有很大关系，但也不能忽略流动相的比例、组成及PH等因素。如果流动相的比例、组成及PH发生变化，也有可能导致出峰顺序发生变化。

另外还与分子量有关系

像我们做糖分析时是单糖先出峰,后面的就是二糖再后是多糖.

跟流动相以及PH都有很大关系，出峰顺序是多种因素共同造成的结果，不可仅凭单一条件来判断。

大多情况是这样的， 但有时流动相，ph 的不同也，顺序有时会变，还有不同厂家，健合技术不同的c18也会出现这种情况！

学习了……

从色谱的分离上说,包括键合和分离两个过程,保留时间取决于固定相和流动相的作用.C18 是中等极性柱,根据流动相的极性可做正向柱也可以作反向柱.
无论是作正向还是反向柱时,对组分的作用要考虑"流动相对组分的洗脱强度"和"组分在固定相和流动相中的分配比".
因为C18是中等极性柱,分析组分的极性是否大于固定相极性?在组分的极性大于固定相极性时说极性大的组分先被洗脱是基本正确的;而在组分的极性小于固定相极性时说极性大的组分先被洗脱是不正确的.加上上面说到的流动相性质的影响,所以我觉得笼统的说RHPLC极性大的先流出是不负责任的.

键合和分配在不同的条件下的影响不同,
在键合作用力占主要地位时(组分在两相的分配差不多),极性原则是成立的.
在分配作用力占主要地位时(固定相对组分的键合作用差不多),极性原则不成立.

很多因素影响，不能单从物质极性判断出峰顺序