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【求助】请教毛细管电泳间接紫外法

毛细管电泳(CE)

  • 请教毛细管电泳间接紫外法原理,例如测K离子
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  • Alvin

    第1楼2010/04/30

    间接紫外法:添加有明显吸收的背景物质让背景与被测物质产生吸光度的差异,那样的话在被测物质到达检测器时检测器就会发现吸收变弱了,有差异就可检出了。对于DAD检测器来说,负峰是可以从技术上消除的,就是通过参比波长的设置实现。在我们的脑子里可能会有这样一种担心,强吸收的背景与无吸收的被测物质混合,如果背景物质浓度不降低的话,混合液处的吸收不会降低,对应的就是毛细管中被测物处的区带的吸收不会低,实质上这种担心是多余的,在实际的操作下我们的确是可以看到被测物区带处的吸收降低了,在检测器上有负吸收产生。那么这一现象说明了一个问题,被测物的区带内没有或有很少的背景物质,只有这样才会有负吸收产生。

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  • plf0717

    第2楼2010/05/01

    写的很好,学习了。

    间接检测就是对倒峰进行定量。

    我实验室有人做过电化学发光间接检测

    xuwenping(xuwenping) 发表:间接紫外法:添加有明显吸收的背景物质让背景与被测物质产生吸光度的差异,那样的话在被测物质到达检测器时检测器就会发现吸收变弱了,有差异就可检出了。对于DAD检测器来说,负峰是可以从技术上消除的,就是通过参比波长的设置实现。在我们的脑子里可能会有这样一种担心,强吸收的背景与无吸收的被测物质混合,如果背景物质浓度不降低的话,混合液处的吸收不会降低,对应的就是毛细管中被测物处的区带的吸收不会低,实质上这种担心是多余的,在实际的操作下我们的确是可以看到被测物区带处的吸收降低了,在检测器上有负吸收产生。那么这一现象说明了一个问题,被测物的区带内没有或有很少的背景物质,只有这样才会有负吸收产生。

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  • sunpengwjh

    第3楼2010/05/01

    对于在紫外没有吸收的物质可以选用间接紫外法,一般可以衍生化或是络合一些在紫外区有吸收的基团!

    若冰(llghn) 发表:请教毛细管电泳间接紫外法原理,例如测K离子

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  • plf0717

    第4楼2010/05/01



    说得很对,衍生也确实是好方法。目前CE-ECL进行衍生后间接检测还较少。

    我可以考虑考虑这方面,呵呵 ,谢谢!

    sunpengwjh(sunpengwjh) 发表:对于在紫外没有吸收的物质可以选用间接紫外法,一般可以衍生化或是络合一些在紫外区有吸收的基团!

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  • sunpengwjh

    第5楼2010/05/03

    把其他实验的方法应用在自己的试验中,并能取得一定的效果就是创新!

    plf0717(plf0717) 发表:

    说得很对,衍生也确实是好方法。目前CE-ECL进行衍生后间接检测还较少。

    我可以考虑考虑这方面,呵呵 ,谢谢!

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  • 金樱子

    第6楼2013/05/13

    那请问无机阳离子怎么衍生呀,比如Na+ K+ Ca2+Mg2+等?

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  • nini2006

    第7楼2013/05/13

    这没法衍生,用间接法就好了。

    金樱子(v2728738) 发表:那请问无机阳离子怎么衍生呀,比如Na+ K+ Ca2+Mg2+等?

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  • 金樱子

    第8楼2013/05/15

    就近找了一篇文献,按文中方法操作,但重复不出来,迷惑不解中!不知有没有高人知道好的方法,请指点一二,在下不胜感激,有文献就更好了,我的邮箱是ddssll007@163.com,再次谢过!

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  • nini2006

    第9楼2013/05/15

    另外发一个新帖吧,这样可以有更多人看到你的求助。

    金樱子(v2728738) 发表:就近找了一篇文献,按文中方法操作,但重复不出来,迷惑不解中!不知有没有高人知道好的方法,请指点一二,在下不胜感激,有文献就更好了,我的邮箱是ddssll007@163.com,再次谢过!

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