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【讨论】内标曲线法的定量问题讨论

液相色谱(LC)

  • 用内标曲线法进行定量分析时,样品中内标物质的峰面积与标准曲线中相差较大时,是否还可以用于定量?

    通常情况下:
    1.制作标准曲线时,内标物质的浓度相同,待测物一定梯度,则可得曲线:

    Ai/As=ax+B 其中x是进样溶液中待测物与内标质量(浓度)比,由此,x的量只于面积比相关。

    2.
    我遇到这样的问题。样品分别要经皂化,萃取,浓缩定容再进样。
    在皂化反应之前把内标物质加入(加入量设计为最终进样溶液与标准曲线时浓度相等),然后乙醚萃取两次,水洗乙醚两次,旋转蒸发干,用1ml甲醇溶解,然后上样,结果内标物质的面积只有70左右,而标准曲线中内标的面积有90多,在这样的情况下,定量是否准确???
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  • 阿图

    第1楼2008/10/08

    做标样的时候,你内标物都没经过前处理,怎么在做样品的时候你要经过前处理呢?最后再加入不行么?

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  • lianfenggood

    第2楼2008/10/08

    完全可以,不过你要校正一下哦

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  • iceman888

    第3楼2008/10/09

    这样看似可行,
    不过在乙醚提取和浓度蒸干处理过程中,如果有样品和内标出现同比损失问题;
    那么,计算出的浓度只是进样溶液的浓度,用此浓度进行稀释倍数换算原样品中的待测物浓度岂不有较大误差?(误差出现在提取和蒸干过程中的损失)

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  • dickwang2008

    第4楼2008/10/09

    内标的作用就是来消除操作引起的误差,只要标准曲线和实际样品的处理方法是一样的就可以。样品中内标的响应小,可能是在处理过程中损失了一部分造成的,这个对你定量没有多大关系。
    Good Luck!

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  • iceman888

    第5楼2008/10/09

    ---------------------------------------------
    如果在样品处理过程中内标有损耗,那么待测物肯定也有所损耗,这样的结果将不再可信。如:
    100ml样品经10ml乙醚提取,然后把10乙醚蒸干,用1ml甲醇溶解,上样。
    测得的上样溶液浓度是可信的,那么原来100ml的样品中的浓度是否也可信?
    毕竟内标都有所损耗,待测物肯定也有损耗,这样倒推回去原样品的待测物浓度可信否?

    dickwang2008 发表:内标的作用就是来消除操作引起的误差,只要标准曲线和实际样品的处理方法是一样的就可以。样品中内标的响应小,可能是在处理过程中损失了一部分造成的,这个对你定量没有多大关系。
    Good Luck!

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  • xydell

    第6楼2008/10/09

    内标物也需要加入到前处理过程吗?这个倒没想过。不过内标法怎么做回收率呢?

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  • iceman888

    第7楼2008/10/10

    ----------------------内标不就是抵消前处理过程中的误差么?

    xydell 发表:内标物也需要加入到前处理过程吗?这个倒没想过。不过内标法怎么做回收率呢?

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