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【讨论】如何用液相检测蛋白质目标纯度

液相色谱(LC)

  • RT。
    我这边是做重组疫苗的,基本都是蛋白质。需要用液相通过面积归一检测原液的目标蛋白纯度,现在的问题是,我们如何保证在一个洗脱条件下样品中的杂质蛋白统统都出来了呢?
    请教各位斑竹板油的看法和经验
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  • 老多_小多

    第1楼2009/01/05

    保证在一个洗脱条件下样品中的杂质蛋白统统都出来,就必须要设置一个好的梯度条件,跟实际样品有关,自己实验下就知道了

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  • yuan_log

    第2楼2009/01/05

    问题是我根本不知道样品中有那些杂质,更不知道含有多少。那么即便我用乙腈从0%洗到100%,恐怕也不能说都吸出来了吧

    emoc98311 发表:保证在一个洗脱条件下样品中的杂质蛋白统统都出来,就必须要设置一个好的梯度条件,跟实际样品有关,自己实验下就知道了

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  • It is me!

    第3楼2009/01/05

    基本上100%就认为全部出来了。
    再说了,你在进行纯度鉴定之前肯定已经经过其他的纯化步骤,肯定已经比较纯了,杂质都比较清楚了。
    选择一个条件后,基本上是可以确定的。

    yuan_log 发表:问题是我根本不知道样品中有那些杂质,更不知道含有多少。那么即便我用乙腈从0%洗到100%,恐怕也不能说都吸出来了吧

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  • 〓猪哥哥〓

    第4楼2009/01/05

    乙腈梯度增加到100%,都出来了,你也可以走最后峰保留时间的2倍时间,观察是否还有峰出现,当然此时有机相的比例应该比较大

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  • colindrj

    第5楼2009/01/06

    里面要加三氟乙酸

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  • yuan_log

    第6楼2009/01/13

    自己顶
    RT,不知道各位老大有没有用液相做蛋白浓度的

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  • klicking

    第7楼2014/10/13

    请问一下 HPLC检测蛋白质 一般用什么柱子?

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  • cxf1027

    第8楼2016/12/30

    同问 请教各位大侠

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