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【讨论】如何做好指纹图谱——样品怎样进行前处理?!

nirvana-huang

2009/02/16

液相色谱（LC）

最近做了很多指纹图谱方面的工作，做过单味药材的，也做过大复方中药的，单味药材的一般比较简单，很多都有很成熟的方法，即使没有，新建一个方法也比较容易，但是复方中药一般很少有成熟的方法，所以很多条件下都需要自己建立，复方中药往往成分复杂，不但成分数量多，种类也很多，这给建立一个好的方法带来了一定的难度！
那么，到底何谓指纹图谱？什么样的指纹图谱才符合要求？做指纹图谱的样品应该怎样前处理呢?!
首先，我们看看其定义：中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。
从定义中可以看到几个要点：1.样品经适当处理，2.“整体性”3.“模糊性”。后两个是指纹图谱的特点，可以理解为其虽然可以整体地反应出样品，但这种反应又是较为模糊的！而第一个要点，在很大程度上决定了指纹图谱的结果，因为处理方法直接决定了最后样品中的成分！
所以，适当的处理样品成了指纹图谱的关键！那么，我们到底应该怎样对样品进行前处理呢？是尽可能全面地反应样品的成分呢？还是通过一些方法除去一些非特征性成分以获得良好的分离度和尽量短的分析时间？那又什么样的才是特征性成分（含量大的往往并非药材中的有效成分）？
欢迎大家赐教、讨论，我们共同学习！

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老多_小多

第1楼2009/02/16

前处理要尽可能全面地反应样品的成分，一些非特征性除去是比较难的，
指纹图谱本来就是模糊的，
我想你的图谱，复方不管怎么配都能得到一样个数的特征峰就算成功

0

〓猪哥哥〓

第2楼2009/02/16

对于复方前处理确实是很有必要。
我见过的有两种，一种是经过固体小柱处理
一种是液液萃取，这是用的最多的。
对于有效没有效，只能做药理数据得出来。从峰型上是得不出药效数据的。
而是得出共有峰和做相似度试验。

1

leizhenming

第3楼2010/11/24

我查过很多资料，请问楼主，为什么做指纹图谱，都是用梯度的多。只是为了让更多的成分出峰嘛？如果不用梯度能否。

0

有水有渝

第4楼2010/11/24

应助达人

你自己都已经说对了一半了，做指纹图谱的一般都是成分比较复杂的，如果不用梯度能在相对较短的时间内把所有特征峰都分离洗脱出来也行。
leizhenming(leizhenming) 发表:我查过很多资料，请问楼主，为什么做指纹图谱，都是用梯度的多。只是为了让更多的成分出峰嘛？如果不用梯度能否。

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