皮皮鱼
第1楼2009/03/22
保留体积Vr和保留时间t之间相差一个流速,让我们忽略这个,直接用保留时间来解释问题,这样会更习惯。
1、在色谱柱不变的情况下,即理论塔板数n和长度L都不变的情况下,色谱峰宽度与保留时间t成正比。或者说:同一次分析里,色谱峰的宽度与其保留时间成正比。因此出峰越晚,峰宽越大。
2、在理论塔板数n不变的情况下,峰高与保留体积(时间)t成反比。或者说:同一次分析中,同样浓度的不同组分,出峰越晚峰高越小。
3、在色谱柱加长的情况下,理论塔板数n和保留体积(时间)t都同时等倍增加,因此色谱峰宽与色谱柱长度的平方根成正比。即色谱柱长增加一倍,峰宽增加到原来的1.414倍。还记得柱长增加一倍,保留时间差增加多少么?这是速度方程的结论,增加一倍。因此分离度R在柱长增加一倍的情况下,只能增加到原来的1.414倍。即:理论塔板高度H不变的情况下,分离度R与柱长的平方根成正比。
4、在色谱柱长度固定的情况下,即保留时间相等的情况下,色谱柱宽度W与理论塔板数n的平方根成反比。这意味着:在同样长度的不同色谱柱上,柱效率n越高,色谱峰越尖锐。通常理论塔板数n即柱效率n,但有时也把单位柱长下理论塔板数称为柱效率。由于毛细管具有极高的柱效,因此同样分析时间下,可以看到毛细管色谱峰明显要尖锐的多。
5、色谱峰高与组分总进样量m成正比。因此在进样体积一定的情况下,峰高与组分浓度c成正比,因此峰高可以用来定量。但峰高还会受到保留时间、理论塔板数n等影响,特别是当色谱峰型不正常,塔板理论不完全成立的时候,这个关系会受到影响,因此通常不用峰高定量。但无论怎么变,根据祖冲之原理,色谱峰面积都和进样量成正比,因此任何时候都能用峰面积定量。只有在峰型良好且尖锐的情况下,用峰高定量比较简单。
什么是祖冲之原理?我晕倒。记得上高中,你怎么推导球的体积公式么?忘了?忘了就算了,记住峰面积可以用来定量就好。
皮皮鱼
第5楼2009/03/24
谢谢夸奖。
我只是看到很多网友对色谱基础已经忘记,所以用自己的话帮大家熟悉一下。
我所讲的所有内容在各种色谱书上基本都有,但也夹杂了我的个人观点在里面,不见得完全正确,希望看的时候,勇于否定我。尽信书,则不如无书。这是我一贯的信条。
我这套东西其实是我讲了多年的色谱课内容的一小部分,但是通过在这里发布,确实也对我很有启发。用笔讲,还是第一次,和在课堂讲授感觉不一样得多。写完了自己回头看一下,发现很多可以进一步完善。不是讲课中讲了就过去的感觉了。觉得对自己理清思路,讲解更清楚更实用性很有帮助。
当老师久了,说话不自主就有点像和教室学生说话的劲头,其实这里大家都是朋友,说过了希望大家能够原谅。
最后,对能够耐心看我的帖子的朋友表示感谢!