【求助】请教LC-MS/MS定量中内标的一个问题

内标不是同样的浓度吗，我觉得应该是你操作上的问题。

如果你进完标曲再回头进低浓度的那个标样其内标稳定吗？也还是很小吗？

标曲又进了一次，还是同样的情况，低浓度内标峰很小，随着浓度升高逐渐正常。操作上的误差不太可能，因为就担心是操作的误差，又很小心的做了两次，问题依旧...

单作内标没有样品的生物样本的平行性如何呢？你选择的内标有没有和样品分开还是在一起的，你做一下基质效应和回收率就知道了，多半是内标选择的有问题或者样品对内标的离子化效率产生了影响。

单独加入内标的样品做过了，没有问题，我也怀疑是样品引起内标峰面积变化，但是为什么是低浓度时影响，高浓度时却正常了呢，想不太明白，请指教

不知道你做的是什么试验，本身你的这种做法就是不对的，内标在标准曲线中应该是选择相同的浓度，改浓度的确定是以最大药物的浓度1/2-2/3为原则。单独的说你的内标自己不成线性是有可能的，你的浓度加的太高，会不会有残存效应你自己考察过没有。高浓度正常是因为即使有残存效应对高浓度的影响不明显，可是对于低浓度的影响则比较明显。

不好意思，你可能没有注意我说的浓度不是内标的高低浓度，应该是标准物质的浓度，内标加的都是一样的，不过在标曲的高低浓度中呈现的峰面积不一致。

哦，不好意思，呵呵，把你现在问题解决了吗，不知道你这些的标准溶液加内标是怎么配置的呢，能不能说说，最后定容体积都是一样的么

我都是标准溶液加10uL，内标加10uL，加入到200uL血清中。问题到现在还是没有搞明白，我自己觉得可能是内标选择不合适导致的，因为内标和其中一个待测物分子量接近，我用的是选择反应监测模式，可能造成了干扰，但是最近忙其他事也没有时间仔细研究，以后有机会再看看