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【讨论】如何配制标准曲线?

  • dickwang2008
    2009/05/31
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 悬赏金额:100积分状态:已解决
  • 我们在进行生物样品分析时,需要建立生物样品分析的标准曲线。我知道的方法有两种:一种是化合物的储备液用有机溶剂,如甲醇、乙腈来稀释得到工作溶液,然后按照方法将一定量的工作溶液加入到生物基质如血浆中,进行处理后进样分析;另外一种方法是化合物的储备液用合适的溶剂来溶解,然后一直使用生物基质来稀释,然后按照样品处理方法来处理
    从事生物样品分析的站友,你们是如何配制生物标准曲线的?上面两种做法你倾向于哪一种?为什么?

    欢迎参与讨论……

    注:如出现“学习了、谢谢、顶”等语句,均被认定为水帖,删无赦。

肖筱 2009/05/31

我比较倾向先配置纯溶剂的高浓度标线,然后按照一定比例加到介质中去,加进去的有机溶剂比例在2%内!

东风恶 2009/05/31

至少5个浓度,以及配制另一个对照进行回收试验。

风之彩 2009/05/31

如果说是要接近真正的样品,那么储备液和工作液最好都是水溶的,毕竟样品中不会有有机溶剂的嘛。不过一般由于溶解性的问题,很少使用纯水溶解的。 我一般用第一种方式做标准曲线。 原因大概是:1 用第二种,标曲各个点的有机溶剂含量不同,这样基质就不同,用质谱测定,高中低浓度的基质效应可能不同。2 第二种方法其实很浪费空白基质的,所以一般也不考虑。

zhufangwei 2009/06/01

这两种做标准曲线的方法我都没有用过,如果将标准溶液添加到样品中作前处理,这不就是所谓的工作曲线么,如果使用基质加标做曲线,一个点所加的应该也是一样的,不然就没法衡量和比较了。

diplomatqs 2009/06/01

我是用后者,配制一定浓度的化合物的储备液(一般用甲醇定容),然后用生物基质来一步步稀释,配成几个点的标准溶液,然后按照样品处理方法来处理,进样。这样做线性确实不好把握,但每一步都精准处理的话达到两个9还是没问题的(液质联用)。 至于第一中,只能在线性一直不好的时候配一条溶剂溶解的曲线找问题,真正意义不大。

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  • 老多_小多

    第1楼2009/05/31

    从干扰的角度出发是按照样品处理方法来处理,但是这样的线性差点

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  • dickwang2008

    第2楼2009/05/31

    请楼主说的详细点。你的曲线是如何配制的?

    emoc98311 发表:从干扰的角度出发是按照样品处理方法来处理,但是这样的线性差点

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  • 老多_小多

    第3楼2009/05/31

    为了线性更好,稀释不加基质

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  • dickwang2008

    第4楼2009/05/31

    楼主这样做,符合有关的规定吗?这能叫模拟生物样品吗?

    emoc98311 发表:为了线性更好,稀释不加基质

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  • 肖筱

    第5楼2009/05/31

    我比较倾向先配置纯溶剂的高浓度标线,然后按照一定比例加到介质中去,加进去的有机溶剂比例在2%内!

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  • 老多_小多

    第6楼2009/05/31

    科学的做法当然是你说的方法,但是现在很多文章也在做假
    至少文章中的回收率就有很多都是修改过的
    做线性我喜欢第二法,因为它更接近样品,结果也会更准确

    dickwang2008 发表:楼主这样做,符合有关的规定吗?这能叫模拟生物样品吗?

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  • dickwang2008

    第7楼2009/05/31

    我们不管作假与否,因为这个与我们无关,也不是我们能决定的。我们只是在探讨方法哪种更适合,从试验角度出发。所以也希望后来的参与者能从这个角度出发进行探讨。

    emoc98311 发表:科学的做法当然是你说的方法,但是现在很多文章也在做假
    至少文章中的回收率就有很多都是修改过的
    做线性我喜欢第二法,因为它更接近样品,结果也会更准确

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  • 东风恶

    第8楼2009/05/31

    至少5个浓度,以及配制另一个对照进行回收试验。

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  • 风之彩

    第9楼2009/05/31

    如果说是要接近真正的样品,那么储备液和工作液最好都是水溶的,毕竟样品中不会有有机溶剂的嘛。不过一般由于溶解性的问题,很少使用纯水溶解的。
    我一般用第一种方式做标准曲线。
    原因大概是:1 用第二种,标曲各个点的有机溶剂含量不同,这样基质就不同,用质谱测定,高中低浓度的基质效应可能不同。2 第二种方法其实很浪费空白基质的,所以一般也不考虑。

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  • zhufangwei

    第10楼2009/06/01

    这两种做标准曲线的方法我都没有用过,如果将标准溶液添加到样品中作前处理,这不就是所谓的工作曲线么,如果使用基质加标做曲线,一个点所加的应该也是一样的,不然就没法衡量和比较了。

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