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【求助】单味药的hplc指纹图谱怎么做?

液相色谱(LC)

  • 各位大师:
    小弟想做一药材的hplc指纹图谱
    其中主要成分是甾体皂苷和酚类化合物
    1)目前,药材不够10批,是否可以做药材的指纹图谱呢?
    2)指纹图谱开始的hplc条件如何确定呢?是从5%已腈或甲醇开始梯度洗脱吗?
    然后再调整?开始的时候,梯度怎么控制?想开始摸摸条件
    请各位朋友发表高见了
    谢谢!!!
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  • 有水有渝

    第1楼2009/06/07

    应助达人

    可从50%或更高比例的甲醇开始,然后根据实际情况调整。

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  • 老多_小多

    第2楼2009/06/08

    要做了才知道情况
    单一的很好做

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  • 〓猪哥哥〓

    第3楼2009/06/08

    1、至少要10批次的。这样才可以做重复性比较
    2、看你成分的多少以及极性的大小。一般摸条件可以从5%开始,然后线性洗脱,最后根据图谱调整比例和梯度表。

    101236 发表:各位大师:
    小弟想做一药材的hplc指纹图谱
    其中主要成分是甾体皂苷和酚类化合物
    1)目前,药材不够10批,是否可以做药材的指纹图谱呢?
    2)指纹图谱开始的hplc条件如何确定呢?是从5%已腈或甲醇开始梯度洗脱吗?
    然后再调整?开始的时候,梯度怎么控制?想开始摸摸条件
    请各位朋友发表高见了
    谢谢!!!

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  • 101236

    第4楼2009/06/09

    你的建议很好,那么在建立指纹图谱时,考虑到不同成分的紫外吸收,摸条件时,波长如何定?药材中有一些末端吸收的峰。谢谢

    03yx2 发表:1、至少要10批次的。这样才可以做重复性比较
    2、看你成分的多少以及极性的大小。一般摸条件可以从5%开始,然后线性洗脱,最后根据图谱调整比例和梯度表。

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  • 天赐甘露

    第5楼2009/06/15

    你的建议很好,那么在建立指纹图谱时,考虑到不同成分的紫外吸收,摸条件时,波长如何定?药材中有一些末端吸收的峰。谢谢[/quote]

    做单位药材指纹图谱前,首先对药材中的化学成分有个全面了解是十分重要的,化学成分研究越全面的药材,其指纹图谱做出来越有意义。其次,按照药材中化学成分(最有意义的是知道有效成分)的性质,选择色谱柱、流动相和吸收波长等色谱条件,其中,选择吸收波长的原则是要照顾到有效成分的最大吸收的同时,也要顾及到有最多吸收峰(即成分的指纹),这与我们过去做的含量测定中,只注重有效成分处的最大吸收和无杂质峰是有区别的,不知道讲清楚没有。

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  • 土老冒豆豆

    第6楼2009/06/30

    应助达人

    做单位药材指纹图谱前,首先对药材中的化学成分有个全面了解是十分重要的,化学成分研究越全面的药材,其指纹图谱做出来越有意义。其次,按照药材中化学成分(最有意义的是知道有效成分)的性质,选择色谱柱、流动相和吸收波长等色谱条件,其中,选择吸收波长的原则是要照顾到有效成分的最大吸收的同时,也要顾及到有最多吸收峰(即成分的指纹),这与我们过去做的含量测定中,只注重有效成分处的最大吸收和无杂质峰是有区别的,不知道讲清楚没有。[/quote]
    所以检测器用二极管阵列检测器,方便你选择测定波长了。

    bc8000 发表:你的建议很好,那么在建立指纹图谱时,考虑到不同成分的紫外吸收,摸条件时,波长如何定?药材中有一些末端吸收的峰。谢谢

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