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【求助】为什么不同条件会出现负峰和峰高保留时间差异很大

gsf8

2009/06/25

液相色谱（LC）

我这2个图第一个用的是已腈：水=7：3。出现峰高很低，感觉吸收不好，于是又换了纯已腈做流动相，出峰时间变的很短峰高也感觉可以，只是峰下来的时候低于基线了。这应该也是负峰现象吧。这样的负峰现象一般是什么原因造成的呢，有没有什么好的解决办法。我还试过95：5，9：1，4：1流动相，但都是出现那个峰下来后低于基线的情况且随着水含量的增加保留时间也在增加，我的测试条件：波长254 浓度5*10-4 流速1.0ml/min 进样量5ul。我们的物质是一种新物质也没有什么成熟的检测方法

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老多_小多

第1楼2009/06/25

图呢

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猫

第2楼2009/06/25

出峰快，峰形肯定好，尖锐且高；出峰慢，样品在色谱柱中被稀释，峰形变差，峰宽加大，峰高降低。流动相中水增加，洗脱能力下降，肯定会造成保留时间的延长。负峰有可能是杂质等物质引起的，试试换个流动相试试。
gsf8 发表:我这2个图第一个用的是已腈：水=7：3。出现峰高很低，感觉吸收不好，于是又换了纯已腈做流动相，出峰时间变的很短峰高也感觉可以，只是峰下来的时候低于基线了。这应该也是负峰现象吧。这样的负峰现象一般是什么原因造成的呢，有没有什么好的解决办法。我还试过95：5，9：1，4：1流动相，但都是出现那个峰下来后低于基线的情况且随着水含量的增加保留时间也在增加，我的测试条件：波长254 浓度5*10-4 流速1.0ml/min 进样量5ul。我们的物质是一种新物质也没有什么成熟的检测方法

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〓猪哥哥〓

第3楼2009/06/25

是出峰的时候出现倒峰,还是走基线的时候,基线下飘?
可能是流动相配比不当或流速变化,流动相不均匀
一般有机相比例越大,出峰越快
gsf8 发表:我这2个图第一个用的是已腈：水=7：3。出现峰高很低，感觉吸收不好，于是又换了纯已腈做流动相，出峰时间变的很短峰高也感觉可以，只是峰下来的时候低于基线了。这应该也是负峰现象吧。这样的负峰现象一般是什么原因造成的呢，有没有什么好的解决办法。我还试过95：5，9：1，4：1流动相，但都是出现那个峰下来后低于基线的情况且随着水含量的增加保留时间也在增加，我的测试条件：波长254 浓度5*10-4 流速1.0ml/min 进样量5ul。我们的物质是一种新物质也没有什么成熟的检测方法

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北方海盗

第4楼2009/06/26

记住一点，也是液相色谱基本知识，液相色谱流动相也参与分配！！！
gsf8 发表:我这2个图第一个用的是已腈：水=7：3。出现峰高很低，感觉吸收不好，于是又换了纯已腈做流动相，出峰时间变的很短峰高也感觉可以，只是峰下来的时候低于基线了。这应该也是负峰现象吧。这样的负峰现象一般是什么原因造成的呢，有没有什么好的解决办法。我还试过95：5，9：1，4：1流动相，但都是出现那个峰下来后低于基线的情况且随着水含量的增加保留时间也在增加，我的测试条件：波长254 浓度5*10-4 流速1.0ml/min 进样量5ul。我们的物质是一种新物质也没有什么成熟的检测方法

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shuizirou

第5楼2009/06/26

用的是什么检测器紫外吧？
负峰是溶剂峰吧

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zhao1025

第6楼2009/07/03

基线下飘，检测器脏了，你用100%的乙腈合适吗？样品中有没有组分需要水溶解?或者体系干净吗？？

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