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关于流动相添加剂

液相色谱(LC)

  • 感觉平时做时很少去关注流动相添加剂的作用,请教各位高手,流动相添加剂有没有什么规律可循啊?比如什么时候用磷酸二氢钠,什么时候用乙酸铵,什么时候用磷酸,还有什么时候加了磷酸二氢钠再调PH值等等,请各位高手指点一二,或者有没有什么文献之类的可以看看呢?
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  • 三人行

    第1楼2014/06/20

    没见过相关文献,认为流动相缓冲能力越强的效果越好。

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  • e_liang369

    第2楼2014/06/20

    加缓冲盐的目的是使游离态化合物转变成结合态,一般是酸性加酸,碱性加碱

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  • 浪淘沙隐

    第3楼2014/06/20

    加流动相缓冲剂及调节pH的作用主要有3点,一是增强流动相的缓冲能力,避免体系受到样品酸碱性的干扰;二是优化峰形,使色谱峰更加尖锐对称;三是抑制某些物质的解离或与体系的某种作用,使其只表现为一个色谱峰。第二点和第三点可能是同时发生的。
    具体该怎么选择缓冲剂,我们的做法是:在起始开发方法时,并不考虑这点,首先就选择某个缓冲剂,配制某个pH的流动相,然后分析样品,如果保留、峰形及分离度不好,就改变条件,比如更换流动相的pH,查看趋势,然后选择最合适的方法参数。这时候,就有可能需要关注一下缓冲剂了。比如,你的流动相pH要求是4.0,那么你不会去考虑磷酸盐,因为磷酸盐在这里没有缓冲能力;又比如,你的方法波长为210nm,那么你就不太会去考虑醋酸盐或甲酸盐,因为这些会严重干扰基线。

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  • bingwang228

    第4楼2014/06/20

    应助达人

    看标准,查文献,再此基础上进行尝试,选择合适的流动相

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  • 老多_小多

    第5楼2014/06/20

    我认为主要还是围绕一个PKa值,只是理论学的不够,所以很多时候都是靠实验尝试

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  • houjjun

    第6楼2014/06/21

    这个和样品、色谱柱等有关系

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  • erge

    第7楼2014/06/23

    为什么呢?哪些缓冲能力强啊?

    三人行(jncxyy2012) 发表:没见过相关文献,认为流动相缓冲能力越强的效果越好。

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  • erge

    第8楼2014/06/23

    恩,这个个人认为有很大关系,只是不太清楚怎么去研究

    老多_小多(emoc98311) 发表:我认为主要还是围绕一个PKa值,只是理论学的不够,所以很多时候都是靠实验尝试

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  • erge

    第9楼2014/06/23

    那像氨基酸这种,是不是要用到缓冲能力很强的添加剂呢?

    浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:加流动相缓冲剂及调节pH的作用主要有3点,一是增强流动相的缓冲能力,避免体系受到样品酸碱性的干扰;二是优化峰形,使色谱峰更加尖锐对称;三是抑制某些物质的解离或与体系的某种作用,使其只表现为一个色谱峰。第二点和第三点可能是同时发生的。

    具体该怎么选择缓冲剂,我们的做法是:在起始开发方法时,并不考虑这点,首先就选择某个缓冲剂,配制某个pH的流动相,然后分析样品,如果保留、峰形及分离度不好,就改变条件,比如更换流动相的pH,查看趋势,然后选择最合适的方法参数。这时候,就有可能需要关注一下缓冲剂了。比如,你的流动相pH要求是4.0,那么你不会去考虑磷酸盐,因为磷酸盐在这里没有缓冲能力;又比如,你的方法波长为210nm,那么你就不太会去考虑醋酸盐或甲酸盐,因为这些会严重干扰基线。

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  • 浪淘沙隐

    第10楼2014/06/24

    缓冲能力强不强是要看pH的,在其缓冲范围则缓冲能力强,否则就不强。氨基酸我做的很少,不是特别了解。但是氨基酸因为同时含有羧基和氨基,用酸性流动相则其氨基电离,用碱性流动相则其羧基电离,所以比较难办,可能离子对会用的比较多。

    erge(lihouquan) 发表:那像氨基酸这种,是不是要用到缓冲能力很强的添加剂呢?

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