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【求助】有关柱压的问题

液相色谱(LC)

  • 请教各位一个问题,我最近刚刚开始做色谱,机子有段时间没人用了,我这几天洗柱子的时候,发现柱压有点问题,我用90%的水冲的时候发现柱压还算稳定,但是换成甲醇的时候发现柱压升的很快,一个小时就增加了一倍,开始怀疑里面有盐,然后用90%的水冲了一晚上发现情况还是这样,想请教哈各位高手这是怎么回事啊?我该怎么处理呢?谢谢大家
    这根柱子用了三年了,不过一直都有用预柱,闹不清楚咋回事了
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  • happy王子矜

    第1楼2009/06/27

    水换甲醇过度的时候压力是比较大,走一阵子应该就低了

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  • dong13410

    第2楼2009/06/27

    是一直在升,而且重复了几次都是这样,刚开机走甲醇的时候也是

    wangzijin 发表:水换甲醇过度的时候压力是比较大,走一阵子应该就低了

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  • 阿du

    第3楼2009/06/27

    换甲醇后不会一直都在升吧,最后稳定在多少压力呢?
    什么柱子?多长?粒径多少?这样大家才好比较。

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  • 柏坡

    第4楼2009/06/28

    只是柱子的问题吗?纯甲醇不应该这么高

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  • 〓猪哥哥〓

    第5楼2009/06/28

    先不接柱子看看压力情况。

    如果不是仪器的问题,接上柱子,把流速,甲醇最后压力,90%水最后压力,柱子等信息发上来。

    hgycook 发表:只是柱子的问题吗?纯甲醇不应该这么高

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  • dong13410

    第6楼2009/06/29

    我们的仪器是天美的,柱子是C18柱,250mm*4.6mm,5um的,有预柱

    仪器之前用过缓冲盐做过血清样品,但是最近半年没用了,我刚接过来用,因为是刚刚接触很多地方都不懂,以为没什么问题,然后想试着做样,用过乙腈:0.1%的磷酸(15:85)跑了两天,发现基线一直不平(当时柱压好像还没有太大的异常),后来当基线问题解决了之后就发现柱压开始不对,一直上升(基线问题是检测器里面有气泡,后来排除了)

    然后就试着用0.5%的醋酸把管路洗了两天,发现不接柱子柱压比较正常(1.0ML/min,9.0bar),这几天我就把柱子接上了,发现柱压还是有异常

    刚开始纯甲醇 1.0ML/min 半个多小时的时间103升到165bar
    后来降低流速 0.4ML/min 62bar开始,一直在上升,能升到大概130bar
    用甲醇就没有稳定的趋势出现
    切换到甲醇:水(80:20) 0.4ML/min 100bar 比较稳定
    甲醇:水(20:80) 0.4ML/min 94bar 比较稳定,还有下降
    甲醇:水(10:90) 0.4ML/min 78bar 比较稳定

    开始我怀疑是柱子里有盐,我还用甲醇:水(10:90)洗过一晚上的柱子,可返回去我再过度到纯甲醇,还是重复上升,我就完全搞不懂了,还请各位高手指教

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  • dong13410

    第7楼2009/06/29

    dong13410 发表:我们的仪器是天美的,柱子是C18柱,250mm*4.6mm,5um的,有预柱,不过据说柱子已经用了三年了

    仪器之前用过缓冲盐做过血清样品,但是最近半年没用了,我刚接过来用,因为是刚刚接触很多地方都不懂,以为没什么问题,然后想试着做样,用过乙腈:0.1%的磷酸(15:85)跑了两天,发现基线一直不平(当时柱压好像还没有太大的异常),后来当基线问题解决了之后就发现柱压开始不对,一直上升(基线问题是检测器里面有气泡,后来排除了)

    然后就试着用0.5%的醋酸把管路洗了两天,发现不接柱子柱压比较正常(1.0ML/min,9.0bar),这几天我就把柱子接上了,发现柱压还是有异常

    刚开始纯甲醇 1.0ML/min 半个多小时的时间103升到165bar
    后来降低流速 0.4ML/min 62bar开始,一直在上升,能升到大概130bar
    用甲醇就没有稳定的趋势出现
    切换到甲醇:水(80:20) 0.4ML/min 100bar 比较稳定
    甲醇:水(20:80) 0.4ML/min 94bar 比较稳定,还有下降
    甲醇:水(10:90) 0.4ML/min 78bar 比较稳定

    开始我怀疑是柱子里有盐,我还用甲醇:水(10:90)洗过一晚上的柱子,可返回去我再过度到纯甲醇,还是重复上升,我就完全搞不懂了,还请各位高手指教

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  • happy王子矜

    第8楼2009/06/29

    不太清楚你的仪器,是单泵四元还是双泵甲醇单独一个泵?

    这样的情况很难判断,也许是哪里有堵的地方,建议你在泵头或管路的其他地方看看有没有盐分析出,有以前柱效不够淘汰下的柱子也可以接上看看什么情况,替换法弄清楚到底是柱子还是其他的原因。也可以把甲醇换乙腈看看试剂有没问题。

    其实,如果你的测试条件在仪器上压力可以稳定,那你先走样品看看情况,能做样品就先做起来看看。

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  • zxxts

    第9楼2009/06/29

    没有碰到过
    有盐也该洗出来了
    用了三年你也该换换了
    我们用一年就换

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