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【求助】出峰时间提前??

液相色谱(LC)

  • 最近用HPLC做了一次C肽,用的是C18柱,A泵是0.1%三氟乙酸,B泵是70%的乙腈加0.1%三氟乙酸,发现出峰时间不对,柱子已经平衡了半个小时了已经,换了根新柱子还是这样!
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  • 柏坡

    第1楼2009/07/17

    提前了很多啊,感觉还是流动相的问题,你换个通道试试

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  • happy王子矜

    第2楼2009/07/17

    应该是A里面的三氟乙酸有问题。

    或者比例阀哪里不对。

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  • peterfirstone

    第3楼2009/07/17

    估计还是流动相中强溶剂比例过大,可能是你的B泵流量不出问题了,或者你配置问题

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  • 哇咔咔

    第4楼2009/07/17

    应该是流动相配比问题。要不然不会差这么大。

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  • 知足常乐!

    第5楼2009/07/17

    有可能是泵的原因,导致流动相比例错误

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  • zhanglsyang

    第6楼2009/07/17

    你换过柱子,个人感觉只有以下两点可能:

    1、确认两相是否送液正常。

    2、三氟乙酸有问题。

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  • henry1208

    第7楼2009/07/17

    这边也遇到过出峰提前的现象,是柱子引起的可能性很小,所以一般不用试柱子。故障一般在脱气机到泵之间。主要可以解释为流动相比例的改变,流动相中强极性的溶剂进到整个管线的比例增大了,如:乙腈进的多水进的少(乙腈那个通道漏液或水那个通道不能吸液)出峰就提前,首先应该做的是测试哪个通道吸液异常,有堵、漏现象;测试哪通道比例阀部分有漏液现象。如果测试出来了,理论上都是换比例阀,一旦手里又没有新阀备用,为了应急就改用正常的通道,把有问题的通道比例阀入口处管线拆下换上一个死堵头,停止使用!就可以使用了。如果不堵,即便更换通道,漏液的那个通道比例阀部分还继续漏液或进空气(只要它的过滤头在溶剂活空气中),保留时间肯定还不稳定!还有一种可能就是(并不多见)活塞杆密封垫导致出峰提前,密封不好就得更换。

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  • happy王子矜

    第8楼2009/07/17

    其实最大的可能就是楼主拿错流动相了

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  • guangcai1980

    第9楼2009/07/17

    应该是流动相的问题,是不是有机相与水相的比例给弄反了!再就是泵的比例阀,检查一下流路。

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  • zhao1025

    第10楼2009/07/18

    有问题的图中产品峰几乎没有保留了,原因很可能有机相泵出问题了。
    流量不对。

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