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【求助】关于梯度洗脱参数的设置

  • smile-875431
    2009/07/29
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 液相色谱测定TBHQ和BHT,方法是采用SN/T 1050-2002
    采用的是梯度洗脱的方法
    色谱条件
    a)色谱柱: C18柱〔250mmX4.6mm)
    b)柱温: 4 0°C
    c)流动相: 1.5%(体积分数)乙酸-甲醇溶液(A),1.5 %(体积分数)乙酸—水溶液(B)
    d)洗脱梯度: 0min -5min ,流动相A为30%,5min-20min,流动相A从30%线性增至80%,20min -30min,流动相A为80%;
    e)流速: 1 m L / mi n ;
    f)检测波长: 2 8 0

    用得是岛津的液相色谱,工作站是class-vp
    我是这样设置的
    Time     Module    Action     Value
    5.01    pumps    B.Conc    70
    20.01    pumps    B.Conc    20
    30.01    pumps    B.Conc    20
    36.00    SPD    stop   

    最后一栏的Module是不是SPD不太记得了 因为在休假有点不记得了

    总之就那一个Module的选项里有stop
    测定后只有TBHQ出峰 BHT没有出峰
    我想应该是这个梯度编写有问题
    但是说明书上米有详细的步骤
    所以请教各位大大们我这样写有问题哇
    能给个梯度编程的资料什么的好么
    我在岛津那一块找了很久么找到
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  • 知足常乐!

    第1楼2009/07/29

    你的梯度设置没有问题
    样品不出峰有很多的原因,有可能是没有分开,也有可能是样品保留时间太长,没有出来,还有可能就是样品浓度太小或者仪器灵敏度太低,达不到检测要求,等等
    把图谱传上来看看吧

0
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  • smile-875431

    第2楼2009/07/29

    我开始设置到 30.01 pumps B.Conc 20 就结束
    没有后面STOP那步骤 后面的浓度我设置为A85% B为15%
    此时TBHQ和BHT都是出峰的
    只是在两者之间会有两三个杂峰 还挺大的 和我配置的100ppm的标样峰高差不了多少 而BHT刚好在杂峰那一片出峰 而且调节A为85%-95%都没有使其分开
    后来想应该是浓度没有回到起始浓度
    就补了后面的一步
    结果是整个图谱只有TBHQ 后面很平整的 一个峰都没有
    所以应该不是检测限的问题 也不是浓度的问题
    可能是保留时间太长 后面的没有跑出来
    要怎么改进呢
    请大大指教

0
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  • smile-875431

    第3楼2009/07/29

    PS:在休假中
    图谱手头么有

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  • smile-875431

    第4楼2009/07/30

    为什么 为什么再没有人理我

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  • 知足常乐!

    第5楼2009/07/30

    此时的TBHQ和BHT的保留时间是多少呢?

    smile-875431 发表:我开始设置到 30.01 pumps B.Conc 20 就结束
    没有后面STOP那步骤 后面的浓度我设置为A85% B为15%
    此时TBHQ和BHT都是出峰的

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  • smile-875431

    第6楼2009/07/31

    TBHQ是6分钟左右
    BHA是18分钟左右

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  • smile-875431

    第7楼2009/08/03

    在以每30分钟看一次有没有回帖的之后

    偶 彻底绝望了

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  • 天天开心

    第8楼2009/08/03

    很想帮你,可是我不会呀,只好帮你顶一下了哦!

    smile-875431 发表:在以每30分钟看一次有没有回帖的之后

    偶 彻底绝望了

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  • 有水有渝

    第9楼2009/08/03

    应助达人

    Time Module Action Value
    0.01 pumps B.Conc 70
    5.01 pumps B.Conc 70
    20.01 pumps B.Conc 20
    30.01 pumps B.Conc 20
    36.00 controller stop
    你看一下,我觉得这个程序不完善,程度结束时没有回到初始浓度的平衡过程,这样就要等基线平衡。记得要让检测时间与梯度时间一致。
    Time Module Action Value
    0.01 pumps B.Conc 70
    5.00 pumps B.Conc 70
    20.00 pumps B.Conc 20
    30.00 pumps B.Conc 20
    31.00 pumps B.Conc 70
    42.00 controller stop

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  • smile-875431

    第10楼2009/08/04

    不死心 弃坑之后又回来了
    谢谢啊

    wodetianla 发表:很想帮你,可是我不会呀,只好帮你顶一下了哦!

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