【求助】为什么β-胡萝卜素标样不出峰？

http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20090901/2090163/
这里有个讨论

而且也提到了1个帖子，参考下
如果有问题在继续探讨

[quote]原文由 ahdyc 发表:检测β-胡萝卜素，标样老是不出峰（只在3分钟左右出三氯甲烷的溶剂峰），也找不出原因。参考方法是GB/T5009.83-2003,但是我用的是 迪马（钻石）C18 250mm的柱子，现在把当时实验的条件列出来，大家帮着分析分析吧。
标物：beta-carotene （进口） 纯度大于98.5% 用三氯甲烷配制标注贮备液，用流动相逐级稀释标准使用液
色谱柱：迪马（钻石）C18 5µ 4.6×250mm
流动相：甲醇+乙腈
柱温：30℃
波长：448nm
中间变换了几次条件：
1.    甲醇：乙腈 90：10 流速：1.0ml/min
2.    甲醇：乙腈 90：10 流速 2.5ml/min
3.    甲醇 100 流速：2.5ml/min
4.    乙腈：甲醇 90：10 流速： 1.0ml/min
5.    乙腈：甲醇 90：10 流速： 2.5ml/min
问题会出在哪里呢？难道这个柱子不适合做β-胡萝卜素？
能。β－胡萝卜素的结构式如图所示。
根据结构式可以推断出分子式为C40H56
分子式两端是苯环，苯环都是强紫外吸收，那么你的检测波长可能是太长了；第二分子量很大，要求色谱填料孔径也大，你可以试一下填料是300A的色谱柱。欢迎致电大连依利特分析仪器有限公司。

β-胡萝卜素最大吸收波长是497，另外β-胡萝卜素在甲醇不溶

谢谢“小多”，那个帖子我也看了，没什么太大意义，因为调整流动相的比例我已经试过了。

不会不出峰，最多峰形差一点
你氯仿溶解可能不是很好，用正己烷试一下

另外建议你走下纯甲醇，用短柱子，我做过，这个流动相应该是可以的

标液我仔细看了，无不溶解的现象，颜色也对。按道理说这个流动相能做出来的，你那标样出峰前有没有三氯甲烷的溶剂峰？

不知道阁下的问题解决了没有，接下来我也要做胡萝卜素 到时候要向阁下请教了。

我们用二极管阵列做的 扫描光谱的时候发现 最大吸收波长 不在448nm 是不是应该在485左右？