仪器信息网APP

选仪器、听讲座、看资讯

立即体验

当前位置：仪器社区 >色谱 > 液相色谱（LC） > 帖子详情

【求助】Agilent1200+DAD进样不出峰怎么回事？

kidant

2009/09/10

液相色谱（LC）

HPLC测苦参总生物碱遇到一个问题，色谱条件：氨基柱，乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液（83：10：7），流速0.6ml/min，波长220nm，柱温20℃。
用1100+紫外检测器出的图不错，标准品在4‘、18’、27‘有3个峰，换到1200+DAD完全相同的条件，设的参比波长是360、450，结果除了开始的溶剂峰外始终没有峰出来，基本是在跑基线。以前没用过DAD，不知道是不是设置上有什么问题，但是感觉再怎么着也该出个峰啊，昨天刚开始做的时候流动相比例配错了，倒是在30’左右出了个大峰，今天上午跑到70‘出了个包，之后再做一直都是基线了。流速、柱温、进样量都调整试过，就是不出峰，问Agilent的工程师，按照他说的进行设置调整，结果还是一样，现在怀疑是不是柱子出问题了，请高手帮忙分析一下，另外谁有Agilent的DAD使用教材给发一个，学学怎么用，谢谢！

相关话题

tianyu9700

第1楼2009/09/10

这个网页上有讨论DAD检测器的使用说明书的你可以看一下
http://www.instrument.com.cn/search/BBSArchive_2001894_1.htm
kidant 发表:HPLC测苦参总生物碱遇到一个问题，色谱条件：氨基柱，乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液（83：10：7），流速0.6ml/min，波长220nm，柱温20℃。
用1100+紫外检测器出的图不错，标准品在4‘、18’、27‘有3个峰，换到1200+DAD完全相同的条件，设的参比波长是360、450，结果除了开始的溶剂峰外始终没有峰出来，基本是在跑基线。以前没用过DAD，不知道是不是设置上有什么问题，但是感觉再怎么着也该出个峰啊，昨天刚开始做的时候流动相比例配错了，倒是在30’左右出了个大峰，今天上午跑到70‘出了个包，之后再做一直都是基线了。流速、柱温、进样量都调整试过，就是不出峰，问Agilent的工程师，按照他说的进行设置调整，结果还是一样，现在怀疑是不是柱子出问题了，请高手帮忙分析一下，另外谁有Agilent的DAD使用教材给发一个，学学怎么用，谢谢！

1

kidant

第2楼2009/09/10

谢谢，我还没来得及搜呢

0

zhhp508

第3楼2009/09/11

我也要学习一下，VWD还熟悉，这个DAD不知道怎么回事。

0

〓猪哥哥〓

第4楼2009/09/11

参比波长处样品有无吸收，如果有吸收，样品峰面积相减就没了。

还有色谱柱也有可能，你试试其他柱子看看有无出峰

0

kidant

第5楼2009/09/11

今天换C18柱测另外的样品一切正常，参比波长处有无吸收还要先验证一下，谢谢指导！
03yx2 发表:参比波长处样品有无吸收，如果有吸收，样品峰面积相减就没了。

还有色谱柱也有可能，你试试其他柱子看看有无出峰

0

小不董

第6楼2009/09/11

应助达人

是否有漏液？样品没有进去？所以没有信号

0

kidant

第7楼2009/09/13

问题原因找到了
提供给我的检测方法没有做系统适应性试验，以前都是用奥泰的柱子，这次我用的是安捷伦的，后来把色谱条件改了，按照药典方法来做，出峰了，不过是快1小时才出来的。之前的条件在冲柱子时用水一冲也出峰了，看来还是方法的问题，害得我以为第一次用氨基柱和DAD就把东西搞坏了了呢
谢谢大家帮忙！版主帮忙关贴吧~~

0

论坛版主招募|新窦

第8楼2009/09/13

这种情况DAD流通池被污染的可能性比较大一点

0

往往外

第9楼2009/09/14

应助达人

谢谢楼主的分享。我用的也是DAD的检测器。也正为这苦恼。谢2楼的。

0

近期热榜

热门活动

猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐

品牌合作伙伴

日立科学仪器

珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）

珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）

日本电子株式会社

赛默飞世尔科技

马尔文帕纳科

上海仪电科仪

梅特勒托利多

布鲁克核磁

举报帖子

点赞用户

好友列表

加载中...

正在为您切换请稍后...