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【求助】BEH HILIC色谱柱测三聚氰胺的流动相比例

  • zhchw_2006
    2009/10/17
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 用液质(API2000)测定三聚氰胺
    用的是waters的 BEH HILIC色谱柱 (2.1*50mm)
    流动相是乙腈和乙酸铵溶液, 走等度的话 一直在1分钟左右出峰,与杂质不能分离;梯度的话,十分不稳定,保留时间不能很好的重现。

    请问大家都是什么流动相啊,具体比例多少,参考一下。 谢谢!
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  • lhz0702

    第1楼2009/10/17

    5% A(水相)维持0.5min->2.0min 20%A->2.5min 50%A->4.0min 5%A,这是Waters公司提供的色谱条件,在我这边效果很好,保留在2.5min左右,可以和周围的杂质分开,也没有发现明显的基质效应。我这边用的是UPLC,用梯度稳定性时,保留时间的稳定性很好。但似乎用HILIC柱时,线性不是很好,很多时候要定量,要用单点校准法。

    zhchw_2006 发表:用液质(API2000)测定三聚氰胺
    用的是waters的 BEH HILIC色谱柱 (2.1*50mm)
    流动相是乙腈和乙酸铵溶液, 走等度的话 一直在1分钟左右出峰,与杂质不能分离;梯度的话,十分不稳定,保留时间不能很好的重现。

    请问大家都是什么流动相啊,具体比例多少,参考一下。 谢谢!

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  • wuyuandaai

    第2楼2009/10/18

    我的住仔和你的一样!但是我闷有你这样的问题 !个人觉得你应该在T度平衡时间不够!意思是下一针进样的时候,压力没有回到平衡时的压力左右!

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  • wuyuandaai

    第3楼2009/10/18

    打错字了,是柱子!

    wuyuandaai 发表:我的住仔和你的一样!但是我闷有你这样的问题 !个人觉得你应该在T度平衡时间不够!意思是下一针进样的时候,压力没有回到平衡时的压力左右!

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  • zhchw_2006

    第4楼2009/10/18

    请问楼上朋友
    你们进一针样 大约多长时间 ?
    十分钟时间不够吗 ?

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  • dickwang2008

    第5楼2009/10/18

    楼主的平衡时间不够,等压力恢复到起始压力时就可以啦。

    zhchw_2006 发表:请问楼上朋友
    你们进一针样 大约多长时间 ?
    十分钟时间不够吗 ?

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  • zhufangwei

    第6楼2009/10/20

    走梯度一般二十多分钟,而走等度十分钟以内,你的问题显然是柱子在走梯度之后没有很好的平衡又接着走样了,所以要调整一下。

    zhchw_2006 发表:请问楼上朋友
    你们进一针样 大约多长时间 ?
    十分钟时间不够吗 ?

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  • wfq0556

    第7楼2009/10/26

    参照美国FDA的方法即可

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  • wuyuandaai

    第8楼2009/10/26

    一般说时间不够是说你T度变化以后回到起始比例以后的时间,并不是你走一个样品所以走的时间!

    zhchw_2006 发表:请问楼上朋友
    你们进一针样 大约多长时间 ?
    十分钟时间不够吗 ?

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  • wfq0556

    第10楼2009/10/26

    最多二十分钟就ok了 但是一定要平衡好 要不时间偏移很厉害

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  • Hurster

    第11楼2009/10/30

    其实BEH HILIC色谱柱是正相柱,楼主可以适当的调节下流动相的比例,当然是按照做正相的思维来调节,我们以前也做过三聚氰胺,如果用hilic做的话,样品的定容溶剂的配比与色谱条件不太匹配,这样导致峰形不好,用CR 1:4混合填料的柱子不存在类似的问题,可是灵敏度不如hilic的那么高,楼主要自己衡量了。个人觉得还是用国标22388-2008的混合填料的柱子好些,毕竟三聚氰胺的最高限量是完全可以满足的。(我们仪器上hilic可以做到约为0.1ppb,cr可以做到10ppb)
    上传一份hilic柱子的使用流动相注意事项,希望对楼主有所帮助,祝你试验顺利!

    zhchw_2006(zhchw_2006) 发表:用液质(API2000)测定三聚氰胺
    用的是waters的 BEH HILIC色谱柱 (2.1*50mm)
    流动相是乙腈和乙酸铵溶液, 走等度的话 一直在1分钟左右出峰,与杂质不能分离;梯度的话,十分不稳定,保留时间不能很好的重现。

    请问大家都是什么流动相啊,具体比例多少,参考一下。 谢谢!

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