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【求助】HPLC检测杨梅酮、槲皮素、芹菜素用30%甲醇/水溶解为什么不出峰

液相色谱(LC)

  • 各位大侠,我最近用液相做黄酮的标品,摸索液相条件。用的C18的柱子,流动相为乙腈、水,以我师姐的经验,溶剂用甲醇/水峰型比较漂亮,但是不是说用流动相溶解比较好么,所以我就做了一个对比,但发现在相同的浓度下,在30%甲醇/水中,杨梅酮、槲皮素、芹菜素不出峰,在30%乙腈/水中出峰,但是峰型不好看。为什么在30%甲醇/水中不出峰呢?
    谢谢各位赐教了,我是个新手,望多多帮助!
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  • 有水有渝

    第1楼2010/01/07

    应助达人

    在30%甲醇/水中,杨梅酮、槲皮素、芹菜素能溶解吗?了解一下这几个物质的性质,调整一下流动相PH看看,你走了多长时间不出峰,你确定在你的采集时间内看到的峰是所要的成分峰吗?

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  • 〓猪哥哥〓

    第2楼2010/01/07

    乙腈洗脱能力比甲醇强,保留时间小,需要再延长分析时间或增大甲醇的比例看看

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  • tyys98

    第3楼2010/01/08

    不能教条,槲皮素、芹菜素等等这些黄酮极性比较弱,要用100%甲醇等溶剂配制贮备液(0.1%左右),然后可以用流动相稀释到50微克/毫升以下的浓度,作为工作液。否则直接配制有可能溶解不充分。
    第2,你的条件(30%甲醇)是洗脱不出来的,需要更高的浓度才行,而30%乙腈洗脱强度较甲醇高。

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  • 知足常乐!

    第4楼2010/01/08

    也有可能就是在甲醇/水的体系中,被测物质吸收弱或无吸收

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  • tyys98

    第5楼2010/01/09

    不可能!甲醇是黄酮的良好溶剂体系,而且黄酮化合物的标准UV吸收光谱都是在甲醇中测定的。

    知足常乐!(wenshaowei-2008) 发表:也有可能就是在甲醇/水的体系中,被测物质吸收弱或无吸收

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