抱歉,各位,前面的这个描述不太准确。
我的洗脱方法是: 0至10分钟,由100%的A相(即1%乙酸)变为90%A:10%B(纯乙腈)。平衡的时候用的依然是100%A(1%乙酸)平衡30min。
chenlover1208(chenlover1208) 发表:请问各位:我用的是反相色谱,C18的柱子,流动相:A相(1%乙酸 ) B相(纯乙腈),梯度洗脱程序初始比例为A相100% 运行10分钟。再加上之前跑基线平衡大约30分钟也都是用初始梯度。柱子在100% A相的条件下至少运行40分钟。看过资料里说一般不要用低于5%的有机相冲洗柱子过久,否则会引起C18链的卷曲,对柱子造成损害。不知道我天天这样运行对柱子的损害大不大?有什么好的方法调节么?