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【求助】请问各位我这样的洗脱程序对柱子的损害大么?

  • chenlover1208
    2010/03/12
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 请问各位:我用的是反相色谱,C18的柱子,流动相:A相(1%乙酸 ) B相(纯乙腈),梯度洗脱程序初始比例为A相100% 运行10分钟。再加上之前跑基线平衡大约30分钟也都是用初始梯度。柱子在100% A相的条件下至少运行40分钟。看过资料里说一般不要用低于5%的有机相冲洗柱子过久,否则会引起C18链的卷曲,对柱子造成损害。不知道我天天这样运行对柱子的损害大不大?有什么好的方法调节么?
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  • 有水有渝

    第1楼2010/03/12

    应助达人

    你的这个方法是标准上的方法吗?可以去买一根亲水性的色谱柱,一般的C18柱不耐纯水相。

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  • chenlover1208

    第2楼2010/03/12

    不是国标的方法。用国标无法完全洗脱。这个是我调整后的,各组分的分离情况不错。因为时间关系现在不能换柱子,有没什么别的好方法?

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  • serlina

    第3楼2010/03/12

    我根柱子半年就不行了

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  • s123sun

    第4楼2010/03/12

    C18的柱子不一定用有机流动相,只是不能用纯水相,我用过缓冲盐流动相,也能检测2000-3000个样品

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  • chenlover1208

    第5楼2010/03/12

    抱歉,各位,前面的这个描述不太准确。
    我的洗脱方法是: 0至10分钟,由100%的A相(即1%乙酸)变为90%A:10%B(纯乙腈)。平衡的时候用的依然是100%A(1%乙酸)平衡30min。

    chenlover1208(chenlover1208) 发表:请问各位:我用的是反相色谱,C18的柱子,流动相:A相(1%乙酸 ) B相(纯乙腈),梯度洗脱程序初始比例为A相100% 运行10分钟。再加上之前跑基线平衡大约30分钟也都是用初始梯度。柱子在100% A相的条件下至少运行40分钟。看过资料里说一般不要用低于5%的有机相冲洗柱子过久,否则会引起C18链的卷曲,对柱子造成损害。不知道我天天这样运行对柱子的损害大不大?有什么好的方法调节么?

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  • Candy

    第6楼2010/03/12

    这得看你用的什么厂家的柱子,看看这根柱子的说明书,有些厂家的柱子可以用纯水冲的,不过绝大多数的不行。

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  • Candy

    第7楼2010/03/12

    迪马的钻石柱的说明书,上面说使用无机盐后要用纯水冲柱子,并且介绍了再生方法:水--甲醇--氯仿--甲醇,每个流动相冲 80ml 左右,大约是 20-30 个柱体积,还说可以用 55 摄氏度的重蒸水里面加上一点 DMSO 冲 。

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  • lingshike

    第8楼2010/03/12

    先以柱子说明书为准吧,我个人的话,用纯水相冲,心里有点怕怕啊。

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  • 有水有渝

    第9楼2010/03/13

    应助达人

    把你调整过流动相后,做得比较好的色谱图传一个上来大家看一下能不能调整。

    chenlover1208(chenlover1208) 发表:抱歉,各位,前面的这个描述不太准确。
    我的洗脱方法是: 0至10分钟,由100%的A相(即1%乙酸)变为90%A:10%B(纯乙腈)。平衡的时候用的依然是100%A(1%乙酸)平衡30min。

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  • ☜譕♥魚☞

    第10楼2010/03/13

    纯水垦丁是不行的!

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