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【求助】请教：HPLC，流动相问题！

  • kuuikaifeng
    2010/04/09
    • 私聊

液相色谱（LC）

  • 我先用乙腈/水提取，然后用agilent C18填料做成的小柱净化，取上清液离心，再取离心后的上清液用10mM醋酸铵稀释，这样用微孔滤膜过滤后能直接上液相吗？（流动相：甲醇/水=45/55），不需要再向样品中加入甲醇吗？我以前做的时候流动相是甲醇/水，样品一般用甲醇溶解啊。谢谢啊
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  • kuuikaifeng

    第2楼2010/04/10

    建议楼上好好回答一下，非常感谢！

    bigpalewolf(bigpalewolf) 发表:why not!?

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  • lvzhijiang

    第3楼2010/04/10

    完全可以啊。醋酸铵水溶液在甲醇/水体系中完全溶解的啊。

    kuuikaifeng(kuuikaifeng) 发表:我先用乙腈/水提取，然后用agilent C18填料做成的小柱净化，取上清液离心，再取离心后的上清液用10mM醋酸铵稀释，这样用微孔滤膜过滤后能直接上液相吗？（流动相：甲醇/水=45/55），不需要再向样品中加入甲醇吗？我以前做的时候流动相是甲醇/水，样品一般用甲醇溶解啊。谢谢啊

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  • 冷冷的冰雨

    第4楼2010/04/10

    溶解样品用溶剂有两点必须具备1、能够溶解样品2、和流动相互溶

    kuuikaifeng(kuuikaifeng) 发表:我先用乙腈/水提取，然后用agilent C18填料做成的小柱净化，取上清液离心，再取离心后的上清液用10mM醋酸铵稀释，这样用微孔滤膜过滤后能直接上液相吗？（流动相：甲醇/水=45/55），不需要再向样品中加入甲醇吗？我以前做的时候流动相是甲醇/水，样品一般用甲醇溶解啊。谢谢啊

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  • 海边

    第5楼2010/04/10

    建议加入适量甲醇，是的样品中甲醇比例和流动相一致，此时溶剂效应会最小，峰形会最好。当然了，如果你现在的峰形应经很好了，也可以不加甲醇。

    kuuikaifeng(kuuikaifeng) 发表:我先用乙腈/水提取，然后用agilent C18填料做成的小柱净化，取上清液离心，再取离心后的上清液用10mM醋酸铵稀释，这样用微孔滤膜过滤后能直接上液相吗？（流动相：甲醇/水=45/55），不需要再向样品中加入甲醇吗？我以前做的时候流动相是甲醇/水，样品一般用甲醇溶解啊。谢谢啊

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  • miss_fairy

    第6楼2010/04/10

    一般都用流动相溶，以减小溶剂效应。
    乙腈和甲醇极性不同，而且加入醋酸盐调节，不知会不会会产生一些偏差。

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