辣椒和辣椒油中总辣椒素含量的测定（ISO 7543-1标准翻译）
阿拉山口检验检疫局技术中心 赵晶晶 贺国庆
中哈管道石油公司 常健辉 译
第一部分：分光光度法
前言：国际标准化组织(ISO)是由各国标准化团体(ISO成员团体)组成的世界性联合会。制定国际标准的工作通常由ISO的技术委员会完成，各成员团体若对某技术委员会确立的项目感兴趣，均有权参加该委员会的工作。与ISO保持联系的各国际组织(官方的或非官方的)也可参加有关工作。在电工技术标准化方面，ISO与国际电工委员会(IEC)保持密切合作关系。
由技术委员会通过的国际标准草案提交各成员团体表决,需取得至少75%参加表决的成员团体的同意，才能作为国际标准正式发布。
国际标准ISO-7543-1由技术委员会ISO/TC 34 /农业食品产品/SC 7/调味品 制定。
ISO 7543 辣椒和辣椒油中总辣椒素含量的测定包括以下部分：
第一部分：分光光度法
第二部分：高效液相色谱法
ISO 1994
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2002年11月6日 星期三 13:15:2002
辣椒和辣椒油中总辣椒素含量的测定
第一部分：
分光光度法
1 范围
ISO 7543 标准规定了用分光光度法测定辣椒、辣椒粉和辣椒油中总辣椒素含量的方法。
本方法的分析需用活性炭脱色。在某些实验条件下，如不进行脱色，则必须参考ISO 7543-21的高效液相色谱法来测定辣椒素含量。
2 标准文献
下列标准所包含的条文，通过在本标准中的引用而构成本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。IEC和ISO的成员持有最新有效的国际标准。
ISO 2825：1981，调味品—供分析样品的制定。
3 原理
用甲醇提取辣椒和辣椒油中的辣椒素，在248nm和296nm测定吸光度。
3.1 辣椒粉
按ISO 7543 中规定的方法，用四氢肤喃提取，用分光光度计测定辣椒素。
3.2 整个辣椒
按ISO 7543 中规定的方法，粉碎样品，然后用四氢肤喃提取，用分光光度计测定辣椒素。
3.3 辣椒油
按ISO 7543 中规定的方法，用甲醇稀释辣椒油,用分光光度计测定辣椒素。
4 试剂
除非特别说明,本方法只使用分析纯试剂,蒸馏水,去离子水或相同纯度的水。
4.1 活性炭,分析使用。
4.2 甲醇，光谱纯。
4.3甲醇水溶液：70+30(V:V)。
4.4盐酸溶液c(HCl)=1mol/L。
4.5 氢氧化钠溶液，新制备的，c(NaOH)=1mol/L。
4.6 四氢肤喃，新蒸馏的或者光谱纯。
5 仪器
常用实验仪器和专用仪器
5.1单标线容量瓶：25mL,100mL,250mL。
5.2 分光光度计，单波长或者双波长，可测定220nm和370nm时的吸光度，配有1cm光路的石英比色皿。
5.3磁力搅拌器
5.4过滤膜：0.45μm。
5.5 回流提取装置：索氏提取器型，配250mL广口平底烧瓶。
5.6真空旋转蒸发器。
5.7水浴
5.8 分析筛：500μm。
5.9分析天平，称量精确度为±0.0001g。
6 取样
确保样品具有代表性，并且在运输和储存过程过程中没有损坏，这一点非常重要。
该标准未对取样做出具体规定，推荐使用ISO9482）。
7 样品制备
7.1辣椒粉
7.1.1 将所有粉用500μm筛（5.8）筛一遍,筛上物按照ISO 2825粉碎成粉末，直到获得合适的尺寸，然后混匀。
7.1.2 称重，精确到0.01g,称取10克左右的均匀粉末（7.1.1），将其转移到回流提取器中。
7.1.3 用100 mL四氢肤喃提取8小时。（4.6）
在水浴条件下，用旋转蒸发器减压蒸馏至近干。
7.2 整个辣椒
7.2.1按照ISO 2825粉碎辣椒，直到粉末全都可以通过500μm筛孔。筛后混匀。
7.2.2称重，精确到0.01g,称取10克左右的均匀粉末（7.1.1），将其转移到回流提取器中。
7.2.3用100 mL四氢肤喃提取8小时。（4.6）
在水浴条件下，用旋转蒸发器减压蒸馏至近干。
7.3辣椒油
7.3.1充分混匀辣椒油。
7.3.2称重，称0.5到1g混匀后的辣椒油（7.3.1），精确到0.0001g,放入回流提取器中。
8 步骤
8.1实验溶液制备
8.1.1辣椒，整个辣椒或者辣椒粉
添加0.05g到0.10g活性炭到7.1.3或7.2.3中获得的提取液中，保证提取液和碳黑之间是10：1的比例。
加90mL甲醇水溶液。（4.3）
用磁力搅拌器（5.3）搅拌30min，静置5分钟。用过滤膜（5.1）过滤到100mL容量瓶中，甲醇水溶液（4.3）稀释到刻度。
过滤膜应该洁净。实验中如出现淡黄色不影响实验结果。
8.1.2辣椒油
在7.3.2中获得的提取液中,添加0.05g到0.10g活性炭，保证辣椒油和活性炭之间的比例是10：1。
加90mL甲醇水溶液（4.3）。
用磁力搅拌器（5.3）搅拌30min，静置5分钟。用过滤膜（5.1）过滤到100mL容量瓶中，甲醇水溶液（4.3）稀释到刻度。
过滤膜应该洁净。实验中如出现淡黄色不影响实验结果。
8.2测量溶液的制备
8.2.1将下列溶液转移到25mL容量瓶(5.1)中。
—3mL水。
—2mL盐酸（4.4）。
用甲醇（4.2）稀释到刻度。
此溶液是空白酸溶液（A）。
8.2.2将下列溶液转移到25mL容量瓶(5.1)中。
—3mL水。
—2mL氢氧化钠。（4.5）
用甲醇（4.2）稀释到刻度。
此溶液是空白碱溶液（B）。
8.2.3.取三个25mL的容量瓶（5.1）,分别标记a1,a2，a3,将下列溶液转移至容量瓶。
—1mL从8.1.1和8.1.2中获得的滤液。
—2.7mL水。
—2mL盐酸溶液（4.4）。
用甲醇（4.2）稀释到刻度。
8.2.4取三个25mL的容量瓶（5.1）,分别标记b1,b2,b3,将下列溶液转移至容量瓶。
—1mL从8.1.1和8.1.2中获得的滤液。
—2.7mL水。
—2mL氢氧化钠溶液（4.5）。
用甲醇（4.2）稀释到刻度。
8.3分光光度测定。
8.3.1双波长分光光度计
用甲醇水溶液（4.3）调整吸光度0和100%。
在波长248nm和296nm，将空白碱溶液（B）放在测量池，将空白酸溶液（A）放在参比池，测量空白的吸光度。
在波长248nm和296nm，将b1的溶液放在测量池，a1的溶液放在参比池，测量每个样品溶液的吸光度，然后分别测量b2和a2,b3和a3。
8.3.2 单波长分光光度计
用甲醇溶液（4.3）调整吸光度0和100%。
放置溶液B在测量池，重新调整仪器的吸光度，然后在248nm和296nm分别测量a1,a2,a3的吸光度。
然后将溶液A放在测量池，在248nm和296nm分别测量b1,b2,b3的吸光度。
9计算
9.1用以下公式计算在波长248nm总辣椒素含量w248,质量百分含量。
其中
AS：样品溶液的吸光度
Ab：空白溶液的吸光度
d:稀释因子（在ISO7543的操作条件下等于25×100）
m:质量，单位g。
当吸光度大于0.8时使用另一种稀释剂。
9.2用以下公式计算在波长296nm总辣椒素含量w296,质量百分含量。
其中
A/S :样品溶液的吸光度；
A/b :空白溶液的吸光度；
d :稀释因子（在ISO7543的操作条件下等于25×100）
m:质量，单位g。
当吸光度大于0.8时使用另一种稀释剂。
9.3 248nm和296nm获得的测量结果不应该大于10%，如果不是这样的话要重新测量。
10 实验报告
实验报告应包括：
—如果已知的话列出取样方法。
—使用的方法。
—获得的测试结果
—如果检查过重复性，列出最后结果
应该描述所有没有在ISO 7543中规定的实验细节或者可选择的实验细节，这些细节有可能影响实验结果。
实验报告应该包括所有完整样品的必须信息。
11注释：
1）ISO 7543—1993，辣椒和辣椒油中总辣椒素含量的测定—高效液相色谱法
2）ISO 948：1980 ，调味品，取样
ICS 67.220.10
描述：农业产品，食品产品，植物产品，调味品，香料，辣椒，化学分析，含量测定，分光光度法
详见附件
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