【求助】液相色谱多肽样品的制备

应助达人

扩散很严重的结果是峰很宽吗，是不是流动相或流速不合理？

是不是保留时间比较长导致的峰展宽？

应助达人

如果仅是峰展宽，没有与其它杂质峰有重合，应该也不会出现制备出来的物质纯度越来越低。

你可以通过分段收集，把目的峰分4、5段收，一般中间收到的都比较纯

你是不是样品溶解的时候，加过碱调节溶解度的，我以前做这个，遇到这样的情况

1）关注目标成分的分子量，太大的组分不宜用普通C18填料，要用大孔径的。
2）扩散的原因有多种，色谱柱效能很重要，不知你事先是否评价过。
3）制备分离的风格不同于分析，核心是数量！要通过提高数量求得纯度，这句话不知你能理解多少。

1. 购买的柱子还是自己填的柱子，几英寸的？貌似你柱子的柱效低；
2. 你使用乙腈和纯水做流动相，不加缓冲吗？一般多肽的纯化都会加一定的缓冲盐；
3. 你的纯化条件够不够好？出峰是不是晚了？纯化不要太注重分离度，除非你要求纯度很高。

制备柱峰型不会很好看。是不是有样品残留在制备柱里面

应助达人

是不是柱子塌陷了