解答:维生素主要分为水溶性维生素和脂溶性维生素两大类,基本都可以用液相色谱法检测,下面分别进行介绍。
(1)水溶性维生素的检测
由于水溶性维生素(主要是B族维生素和维生素C)易溶于水,极性较强,很难直接在如C18等反相柱上保留。因此该类物质分析一般有两种方式:一是用含NH2等极性键合相的正相色谱柱,如图6-24的HILLIC模式;二是在反相色谱(如C18、C8等)流动相中添加离子对缓冲试剂(如Na3PO4、KH2PO4、己烷磺酸盐等)增加其保留时间,见图6-25。
图6-24 HILIC模式色谱柱分离水溶性维生素的色谱图
1—烟酰胺;2—维生素B7;3—维生素B6;4—维生素C;5—维生素B12;6—维生素B1
图6-25 C18柱分离水溶性维生素色谱图
1—维生素B1;2—维生素C;3—烟酸;4—维生素B6;5—泛酸;6—叶酸;7—维生素B12;8—维生素B2
(2)脂溶性维生素的HPLC检测
脂溶性维生素(维生素A、D、E等)极性较弱,可以直接用C18、C8等反相色谱柱分离。需要注意的是,维生素E(生育酚)共有α、β、γ、δ四种结构类型,C18等反相柱很难将这四种完全分开,而硅胶、二醇基(Diol)等正相柱能很好地分离这四种结构,见图6-26。
图6-26维生素E在二醇基色谱柱上的色谱图
1—α-维生素E;2—β-维生素E;3—γ-维生素E;4—δ-维生素E
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