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分光光度计和酶标仪

分析化学

  • 分光光度计和酶标仪区别



    分光光度计：利用单色仪或特殊光源提供的特定波长的单色光通过标样和被分析样品，比较两者的光强度来分析物质成分的光谱仪器。分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为：(1)200～400nm的紫外光区,(2)400～760nm的可见光区,(3)2.5～25μm（按波数计为4000cm<-1>～400cm<-1>）的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或（或原子吸收分光光度计）。

    酶标仪：实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。酶标仪按照功能的不同划分,可以分为（1）光吸收酶标仪（可见酶标仪，紫外/可见酶标仪）（2）荧光酶标仪（3）化学发光酶标仪。

    分光光度计和酶标板存在一些不同之处，具体差别体现在以下几个方面：

    （1）盛装待测溶液的容器：

    分光光度计用的是比色皿，酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用，每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成，对抗原抗体有较强的吸附作用，因此用它作为固相载体，酶标板通常为48孔或96孔，每个微孔可以盛装不同的溶液。

    （2）光路的方向：

    分光光度计是水平光路，而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小，不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。

    （3）光路的长度：

    由于光密度（OD值）与吸光系数, 待测组分的浓度以及光路长度成正比关系。分光光度计采用的比色杯的宽度通常是1cm，所以光路长度固定为1cm。因此不同仪器，不同批次测量的数据具有同样的可比性。而酶标仪采用的是垂直光路, 所以光路的长度应该是液体液面的高度。所以测得的值受到样品的体积的影响。

    （4）表示方法

    分光光度计一般采用A来表示（A=-log(I/I。)=-lgT=kLc），而酶标仪通常不仅用A,有时也使用光密度OD来表示吸光度。

    （5）工作环境要求

    分光光度计：该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。

    酶标仪：仪器应放置在低于40分贝的环境下。为延缓光学部件的老化，应避免阳光直射。操作时环境温度应在15℃－40℃之间，环境湿度在15％－85％之间。　操作电压应保持稳定。操作环境空气清洁，避免水汽，烟尘。保持干燥、干净、水平的工作台面，以及足够的操作空间。

    当然酶标仪的应用范围要远远大于分光光度计，它可以来定量分析抗原和抗体含量。
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  • learner1999

    第1楼2010/11/30

    应助达人

    那酶标仪可以替代分光光度计使用吗？

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  • xuru560

    第2楼2010/11/30

    酶标仪由于它的光路和液面高度等因素有关，故测得的前后数据不具有可比性，而分光光度计则具有可比性。

0
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  • 我的8090

    第3楼2010/12/01

    我觉得可以，用酶标板代替比色皿！

    learner1999(learner1999) 发表:那酶标仪可以替代分光光度计使用吗？

0
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  • huangza

    第4楼2010/12/01

    应助达人

    有没有分光光度计可以分析的而酶标仪不能分析的呢？

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  • xuru560

    第5楼2010/12/01

    分光光度计中还有红外风光光度计这种类型，应该可以测原子吸收吧，，这个我没侧过 不好意思 ，不能准确的告诉你试验的精确性。。

    huangza(huangza) 发表:有没有分光光度计可以分析的而酶标仪不能分析的呢？

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  • 我的8090

    第6楼2010/12/01

    多！酶标仪的可选择波长比较少！

    huangza(huangza) 发表:有没有分光光度计可以分析的而酶标仪不能分析的呢？

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  • yd8888

    第7楼2010/12/01

    酶标仪的原理差不多！只是滤光片少，决定了他们的好些不能相容！

    我的8090(yd88886666) 发表:多！酶标仪的可选择波长比较少！

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