【求助】HPLC检测样品遇到问题了。怎么解决？？

　　你是用正相柱还是反相柱？为什么用些奇怪的流动相？

　　一般反相柱用甲醇或乙醇与水，正相柱用正己烷与异丙醇．

应助达人

你检测的是什么样品，要这么弱极性的流动相？

样品是脂溶性的，应该是极性比较弱。

类胡萝卜素。主要是C40分子，中央是多聚烯链

用的是反相柱，流动相是参考的别人的方法，我测的是类胡萝卜素，可能这种物质本身极性就很差吧，我也不懂。

流动相是参考的别人的方法，我测的是类胡萝卜素，可能这种物质本身极性就很差吧，我也不懂。

柱子是C18反相柱，填料是硅胶，我进了10ul的样，可能提取方法待改进，谢谢解答！

用针对弱极性的CN柱试试

极性比较弱的话，用反相C18柱或C8柱都可以。

看一看类胡萝卜素的溶解性，首选乙腈：水体系。从乙腈较大的比例开始摸索。如：95％乙腈、90％、80％等。一般可以每次跳10个百分点。如果在乙腈中溶解性不是太好，可以选择乙腈与甲醇混合为有机相，与水相混合。肯定是可以出来的。这个物质应该不是太难。

另外，对于参考文献，一方面是要“参”，即参照人家的；另一方面要“考”，即要思考自己的。

C18反相柱一般不用氯仿，乙酸乙酯做流动相。进样的样品要处理干净，然则会影响分析结果

用氨基柱或许会好些......

应助达人

楼主把你的梯度过程写清楚一下。