青林
第4楼2011/06/17
磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂,由于它们是二级解离,有二个pKa 值,所以用它们配制的缓冲液,pH 范围最宽:NaH2PO4: pKa1=2.12,pKa2=7.21; Na2HPO4:pKa1=7.21,pKa2=12.32
配酸性缓冲液:用NaH2PO4,pH=3~4,
配中性缓冲液:用混合的两种磷酸盐,pH=6~8,
配碱性缓冲液:用Na2HPO4,pH=10~12。
用钾盐比钠盐好,因为低温时钠盐难溶,钾盐易溶,但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用磷酸钠而不能用磷酸钾,因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。
磷酸盐缓冲液的优点为:①容易配制成各种浓度的缓冲液;②适用的pH 范围宽;③pH 受温度的影响小;④缓冲液稀释后pH 变化小,如稀释10倍后pH 的变化小于0.1。
其缺点为:①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀;②会抑制某些生物化学过程,如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用.