【求助】怎样将目标药物从复杂基质中分离出来？

应助达人

楼主能先说明一下你的具体提取方法吗？

我试过几个方案
1.因为其中有一种是酸性药物，所以用酸化乙酸乙酯（三氯甲烷）8ml提取，8000r/min离心10min，残渣重复提取一次，合并上清，正己烷去脂，40度氮气吹干，1ml流动相洗残渣，PSA 0.1g去色素，上机检测。（用三氯甲烷也试过，乙酸乙酯可以将药物提取出来，但是杂质也全部提取出来了，三氯甲烷相比乙酸乙酯提取干净很多，但提取效果没乙酸乙酯好）。
2.由于本实验做肝脏采用1%偏磷酸40%甲醇提取2次，提取回收率均可达80--90%，本实验室土壤中用1%偏磷酸40%甲醇20%乙腈提取均可达80--90%。所以
3.由于粪便中1%偏磷酸提取不出来那个酸性药物，所以试过2%、3%、4%的偏磷酸，2%就可以提出来，所以采用了2%偏磷酸40%甲醇20%乙腈10ml提取，正己烷去脂，硫酸铜沉淀蛋白，PSA去色素，
4.用2%40%20%提取后图谱分离度不好，基线不平，难以计算回收率，所以采用液液萃取的方式净化，用乙酸乙酯反萃取2次，吹氮气，流动相溶解，上机检测。
可是图谱：
基线仍然高，杂志干扰大，分离度差， 个别药物回收率 还是很低。
图：

看你的图，也不知道流动相是否是最合适的，都是看峰宽还是挺大的，造成分离度不够好，可以换流动相或者柱子在试验吧
至于基线，基质复杂，没有什么特别好的办法，只要想办法尽量净化样品

这根柱子柱效不怎么好了，因为样品脏，不敢用好柱子，所以就先用废柱子跑了。至于流动相 我们当时摸索了很长时间，关于药物的梯度洗脱条件试过很多种方法， 好不容易将8种药物可以完全分离出来了（标样）。
其实我更想问的是1.怎样将8种药物 全提取出来？（因为试过很多试剂 回收率一直不怎样
2.基线怎样降低到跟标准品的基线差不多）
基质内源性干扰很大，是否可以用大孔树脂 吸附杂质？
图中前3种药物 出峰时干扰不是很大，后面5种时 干扰就多了，是不是基质中非极性杂质更多些？怎样针对性去除？请大家帮帮忙分析下好么？

请问有木有人做过环境样品的前处理啊？比如地下污水、土壤、家禽粪便等的提取和净化？请不吝赐教！！

过于复杂的样品你可以用LCMS，在SIM下基本上没有什么干扰。

是啊！我也想用液质联用做这个，可是我们老板非要让在液相上面定量。他要让我们把每种药物都分离的很干净，回收率都达标，没办法啊！
看别人发表的文献也是在液相上做的，也是多残检测，杂质就很少，定量限也很低，可是自己就是做不出来，哪怕是我取0.5g样品做，干扰还是很大。
就是想不通，同样的药物在其它组织中同样的提取方法，回收率都很高，为什么这个基质就提取不出来？回收率很低！

我认为你的图并不太差。而且是十分有希望！
不要认为进几针图达不到标就放弃。因为你还只是在摸索。要根据这些图再进行调整。
首先，这八个物质中只有一个是严重不行的。另一个是受到一定的干扰。而其余六个很有希望分开。
第二，进样量还可减小一点。因为搞分析只要能检得到，分得开就行，进样量大了反倒易拖尾。
第三，你的柱子应该是普通C18的。这种柱子封端不行。可适当加三乙胺封闭未键合的硅醇基，改善峰形，提高分离度。三乙胺浓度大约0.1％。

嘿嘿~谢谢鼓励！
1.这8种药中第三种药物标准品就是相当难容，在弱碱性条件下溶解度还好些，还有就是第6个药，出峰时总有较大的干扰峰，在我试过的有机溶剂中都会出现那个比药物峰还高的杂质峰。
2.我的进样体积：40ul，估计进样量确实大了，
3.呵呵。。。柱子就是普通的C18柱，
我有疑问：您说可适当加三乙胺封闭未键合的硅醇基，改善峰形，提高分离度。三乙胺浓度大约0.1％。这个具体怎么操作呢？我的流动相是乙腈：0.5%甲酸水