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氨基酸,为什么不给我液相的国家标准方法

  • 老多_小多
    2011/07/21
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 坛子里经常有版友问检测氨基酸的问题,我就奇怪,为什么那么多液相色谱测定的方法,国家标准方法却没有用液相测定氨基酸的,国家标准都是用氨基酸分析仪来测定,也很复杂,也很复杂呀,然后液相成了大众仪器的年代,居然没有一个标准方法。氨基酸分析仪标准方法检测天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸和精氨酸等十六种氨基酸,人体必需的是18种,标准方法也是有缺陷啊。

    好了,先不讨论标准方法了,我就摆弄摆弄,给大家参考下,其实氨基酸分析没那么复杂。食物中含有大量非氨基酸的其它成分如有机酸、脂肪、蛋白质等,它们都会干扰氨基酸的色谱测定。有人说:在测定之前,需要脱蛋白及浓缩、净化等样品前处理。我在想,有这个必要么?还有的人说,液相做氨基酸得用氨基酸专用色谱柱,这个是否又有必要呢?我几个图给大家看看吧。采用了2个不同的色谱柱做的比较,一个是氨基酸专用柱,一个是普通C18柱,两个色谱柱均是上海月旭公司一个厂家的,这样具有比较性。

    一、Ultimate AA,(4.6m*250mm,5um)



    二、Topsil C18,(4.6m*250mm,5um)



    图谱怎么样,让让大家评论吧氨基酸的测定,具有代表性的用柱前衍生的方法,包括有用衍生试剂的邻苯二甲醛、异硫氰酸苯脂、荧光胺、氯化丹酰等,还有AccQ-Tag法。反应操作各不相同,有的在室温下只须混合即可快速反应,有的在反应中必须加热,还有的反应后必须净化等。

    大家都用什么方法呢,做的效果如何呢?你认为国家标准没有液相色谱法测定氨基酸是否合理呢?
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  • 雪妖

    第1楼2011/07/21

    我觉得国家的标准很多都已经很旧了,根本就不能代表当前最适合最合理的检测方法,这种应该及时更新取代

    老多,你的结果表这么一模一样,是不是发错了

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  • ld321

    第2楼2011/07/21

    LC做氨基酸分析仪的重现性不好!不同人的定量结果差异较大!

    另外,国家标准没有老,反而出台了相关的鉴定规程来检定仪器,确保检测结果的准确性可比性,氨基酸分析远比想象中负责。

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  • 老多_小多

    第3楼2011/07/21

    果真是错了,马上改

    雪妖(czj_1027) 发表:我觉得国家的标准很多都已经很旧了,根本就不能代表当前最适合最合理的检测方法,这种应该及时更新取代

    老多,你的结果表这么一模一样,是不是发错了

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  • pengliying851

    第5楼2011/07/21

    我同学测的氨基酸,也会有个杂峰在里面,很高峰型很漂亮的杂峰。

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  • 老多_小多

    第6楼2011/07/21

    那个漂亮的杂峰是衍生试剂峰

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  • glory143

    第7楼2011/07/21

    这是用什么衍生剂,什么牌子的液相做的?我们的氨基酸重复性有很大问题

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  • yanlele3207

    第8楼2011/07/21

    我在用安捷伦的液相测苏氨酸的含量,发现了很多的问题,第一,出峰时间不一样。第二,甘氨酸和苏氨酸分不开肯定会造成影响。第三,杂峰是此起彼伏。第四,没有专门的单独标准品,只能用混合标准品来测定。无比的纠结。

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  • zhz1285

    第9楼2011/07/21

    楼主兄弟,你是给月旭做广告呢还是?
    你的谱图疑点太多,把异常的峰型掩盖的很好啊,能放大吗?
    还有就是你这16种氨基酸用很多方法处理么,得耗费多久时间?

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  • 老多_小多

    第10楼2011/07/22

    回8楼:出峰时间或者分不开,你得改善好你的梯度程序,因为测定的组分多,所以程序设置有点复杂,至于单独的标准,如果你没有,你可以用生化级氨基酸试剂来做标准定位,试剂便宜嘛

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